無血清細胞凍存液,通用于各種動物細胞株(腫瘤細胞和常規(guī)細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存(>5 年)。該凍存液含 DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分,提高細胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。
細胞凍存步驟:
1、 常規(guī)方法收集對數(shù)期的貼壁細胞或懸浮細胞于試管中。
2、 根據(jù)培養(yǎng)細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細胞數(shù)。
3、 將所需數(shù)目的細胞懸浮液置于離心管中,1000rmp,5 分鐘離心收集培養(yǎng)細胞沉淀,*棄去離心管中的上清液。
4、 加入適量的Cell Freezing Medium 細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度約為 5×105-1×107/ml。輕柔地混勻細胞,制成細胞混合液。
5、 將離心管中的細胞混合液分裝于已標記的凍存管中,建議每管 1ml 或 1.5ml。
6、 直接將分裝好的細胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長期冷凍保存。
7、 如果想液氮中長期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天時間,方可移至液氮罐中保存。
凍存細胞復(fù)蘇步驟:
從冰箱中取出凍存的細胞,立即放入 37℃水浴槽中快速解凍。
待凍存管中細胞混合液*融化后,立即加入 1ml 細胞培養(yǎng)基于冷凍管中與細胞混合,加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩加入到細胞沉淀,輕柔地混勻,將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)容器中。
鏡檢細胞后,可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細胞常規(guī)培養(yǎng)。
以上僅供參考,希望對您有所幫助哦!
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