組織切片常見(jiàn)耗材與性能介紹
組織切片是以生物組織為材料制成薄片的過(guò)程,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)等領(lǐng)域,是組織學(xué)發(fā)展的重要工具及方法。在組織切片過(guò)程中需用到多種耗材,隨著切片技術(shù)的不斷發(fā)展,耗材的品牌和種類也是多種多樣,選擇正確的耗材能夠幫助我們更好的制備切片,提高切片的質(zhì)量。
一、刀片
1、刀片的材質(zhì)
一次性刀片:采用不銹鋼材質(zhì)制成的一次性刀片適用于硬度較小的組織切片,是一種經(jīng)濟(jì)實(shí)惠且耐用的刀片,適合刀片需求量較大的實(shí)驗(yàn)室。
鋼刀/鎢鋼刀:鋼刀和鎢鋼刀主要用于硬質(zhì)和特殊研磨材料材料的切片,例如骨頭、樹(shù)脂、塑料等材料,是醫(yī)院骨科病理實(shí)驗(yàn)室和材料工業(yè)常用的刀片,且鎢鋼刀的硬度要高于鋼刀。
玻璃刀/鉆石刀:主要用于超薄切片,玻璃刀制作簡(jiǎn)單,價(jià)格低廉,但刀刃脆不耐用,不能用于切割硬質(zhì)材料。鉆石刀質(zhì)地堅(jiān)硬,經(jīng)久耐用,能夠切割硬度較大的組織,可獲得比玻璃刀質(zhì)量更好的連續(xù)切片,但其價(jià)格相對(duì)昂貴。
2、刀片的寬窄
寬刀片:適用于硬度偏大的組織,同時(shí)適合組織樣本較厚的組織切片,具有較長(zhǎng)的使用壽命。
窄刀片:適用于中度、軟組織切片,具有較好的成串效果。
3、刀片的幾何形狀
刀片的設(shè)計(jì)決定了刀片切割的精度和刀片的耐用度,增加刀面的數(shù)量可以提高切割的精度及切割各種組織的能力。銳化后的刀片一般具有兩個(gè)刀面,具有兩個(gè)刀面的刀片經(jīng)過(guò)再次銳化,就會(huì)顯示出三個(gè)刀面。
哥特式設(shè)計(jì)刀片:哥特式設(shè)計(jì)刀片的刀面頂面為弧形,普通刀片的刀面為平面,刀片與組織接觸時(shí),普通刀片是面與面的接觸,而哥特式刀片是無(wú)數(shù)個(gè)點(diǎn)接觸組織,因此哥特式刀片更加鋒利且耐用。
二、石蠟
石蠟是石蠟切片過(guò)程中常用的耗材,主要在組織浸蠟和包埋過(guò)程中使用,對(duì)組織起到固定支撐的作用。根據(jù)石蠟的熔點(diǎn)以及滲透性分為不同的類型。
低熔點(diǎn)石蠟:相比于普通石蠟熔點(diǎn)較低的石蠟,由于熔化溫度較低可以有效的保護(hù)組織內(nèi)的DNA和RNA。
高熔點(diǎn)石蠟:在一些溫度較高的工作環(huán)境中,高熔點(diǎn)的石蠟不易熔化,有利于石蠟的儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/span>
高滲透石蠟:該類型石蠟內(nèi)含有DMSO,具有較高的滲透性,針對(duì)一些較大、難浸蠟的組織樣本效果較好。
三、載玻片
載玻片是制備組織切片最基本的耗材,完成切片、展片后的組織需要粘附在載玻片上,從而進(jìn)行染色、封片等步驟,最終在顯微鏡下進(jìn)行觀察。
1、載玻片的化學(xué)成分:載玻片主要由玻璃和鉀鈣鈉鎂鋁等元素組成,根據(jù)組成成分載玻片分為白色載玻片和綠色載玻片,綠色載玻片中鐵元素及其他微量元素含量較高,因此綠色載玻片易產(chǎn)生自發(fā)熒光,所以進(jìn)行熒光實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)選擇白色載玻片。
化學(xué)物質(zhì) | 百分比(%) |
二氧化硅 | 72.15 |
氧化鈉 | 14.25 |
氧化鈣 | 6.25 |
氧化鎂 | 4.1 |
氧化鋁 | 1.12 |
氧化鉀 | 1.15 |
三氧化硫 | 0.3 |
氧化鐵 | 0.3 |
三氧化鈦 | 0.05 |
2、粘附型載玻片:在組織切片制備過(guò)程中,經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)組織從載玻片上脫落的情況,粘附型載玻片通過(guò)在玻片表面添加一種涂層(粘附性化學(xué)物質(zhì)),可以有效的防止組織脫落。如在處理冰凍切片、比較容易脫片的組織時(shí)需使用粘附型載玻片。
四、冰凍包埋劑
冰凍切片不同于石蠟切片,不需要脫水以及石蠟包埋等過(guò)程,但冰凍切片前需用冰凍包埋劑包埋組織,冰凍包埋劑主要起到組織支撐的作用,以增加組織的連續(xù)性,減少皺折及碎裂。
OTC包埋劑:是一種聚乙二醇和乙烯醇的水溶性混合物,目前廣泛應(yīng)用與組織病理實(shí)驗(yàn)室,由于OTC包埋劑是水溶性,所以在漂片時(shí)可溶于水,在后期染色過(guò)程中不會(huì)增加組織的背景顏色。冰凍切片前可先用OTC包埋劑浸泡組織,切片時(shí)再用OTC包埋劑包埋,有利于提高切片質(zhì)量。
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