DiR
MCE 國(guó)際站:DiR
CAS:100068-60-8
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲(chǔ)條件:4°C, sealed storage, away from moisture and light
生物活性: DiR (Cy7 DiC18) 是一種親脂性近紅外熒光花青染料,用于染色膜。
體外:羰花青染料廣泛用作 Di 來(lái)標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。長(zhǎng)鏈羰花青包括 DiO (DiOC18 (3))、DiI (DiIC18 (3))、DiD (DiIC18 (5)) 和 DiR,以及二烷基氨基苯乙烯基染料 DiA (4-Di-16-ASP) 用于標(biāo)記膜和其他疏水結(jié)構(gòu)。DiIC16 (3) 具有比 DiI (C18) 更短的烷基取代基 (C16)。它們?cè)谥|(zhì)環(huán)境中具有ji高的消光系數(shù)、環(huán)境依賴(lài)性熒光和短的激發(fā)態(tài)壽命。它們?cè)谑覝叵率怯蜖钗?,在水中發(fā)出微弱熒光,但當(dāng)摻入膜中或與親脂性生物分子結(jié)合時(shí),它們發(fā)出高熒光且相當(dāng)耐光。這些光學(xué)特性使它們成為細(xì)胞質(zhì)膜染色的理想選擇。一旦應(yīng)用于細(xì)胞,這些染料就會(huì)在質(zhì)膜內(nèi)橫向擴(kuò)散,導(dǎo)致整個(gè)細(xì)胞染色[1]。 DiO、DiI、DiD 和 DiR 呈現(xiàn)出不同的綠色、橙色、紅色和紅外熒光,從而促進(jìn)活細(xì)胞的多色成像和流式細(xì)胞術(shù)分析。DiO 和 DiI 可分別與標(biāo)準(zhǔn) FITC 和 TRITC 過(guò)濾器一起使用。其中 DiI 及其類(lèi)似物是zui常用的,因?yàn)樗鼈兺ǔ1憩F(xiàn)出非常低的細(xì)胞毒性。此外,DiI 廣泛用于測(cè)定 LDL 和 HDL 等脂蛋白。親脂性氨基苯乙烯基染料 DiA 也常用于神經(jīng)元示蹤[2]。 一般方案1. 制備 Di 染色液 a. 制備 DMF、DMSO 或乙醇儲(chǔ)備溶液:儲(chǔ)備溶液應(yīng)在二甲基甲酰胺 (DMF)、二甲基亞砜 (DMSO 或乙醇 DMSO 中配制,濃度為 1-5 mM。作為 Di 的溶劑,DMF 優(yōu)于乙醇。儲(chǔ)備溶液應(yīng)任何未使用的溶液需要等分并重新冷凍至少 -20℃。避免反復(fù)冷凍/解凍循環(huán)。溶液可儲(chǔ)存 6 個(gè)月。b. 準(zhǔn)備工作溶液:將儲(chǔ)備溶液稀釋到合適的緩沖液如無(wú)血清培養(yǎng)基、HBSS 或 PBS 配制成 1 至 5 μM 的工作液。我們不建議將水溶液存放超過(guò)一天。注意:工作液的最終濃度2. 懸浮細(xì)胞a. 1000 g 4℃離心 3-5 分鐘,棄上清,PBS洗2次,每次5分鐘。細(xì)胞密度為 1×106/mL。b. 加入 1 mL Di 工作液,室溫孵育5-30分鐘。C. 4℃,400g離心3-4分鐘,棄上清。d.用PBS洗滌2次,每次5分鐘。e.用無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基或PBS重懸細(xì)胞,熒光顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)觀察。3.貼壁細(xì)胞a.在無(wú)菌蓋玻片上培養(yǎng)貼壁細(xì)胞。b.從培養(yǎng)基上取下蓋玻片并吸出多余的培養(yǎng)基。c.加入100 μL工作液,輕搖使之wan全覆蓋細(xì)胞,室溫孵育5-30分鐘。d.用培養(yǎng)基洗兩次,每次5分鐘。通過(guò)熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀觀察。 MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
熱門(mén)產(chǎn)品:Flavin adenine dinucleotide | Sakuranetin | Morin | IPAG | M-1211 | Lazertinib | Minoxidil sulfate | Lusutrombopag | KB02-JQ1 | Isotretinoin
研究領(lǐng)域:Others
作用靶點(diǎn):Fluorescent Dye
熱門(mén)產(chǎn)品線:重組蛋白 | 化合物庫(kù) | 天然產(chǎn)物 | 熒光染料 | PROTAC | 同位素標(biāo)記物 | 寡核苷酸
Trending products:Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Fluorescent Dye | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds | Oligonucleotides
參考文獻(xiàn):
[1]. Gan WB, et al. Multicolor "DiOlistic" labeling of the nervous system using lipophilic dye combinations. Neuron. 2000 Aug;27(2):219-25.[2]. Swift MJ, et al. Applied electric fields accelerate the diffusion rate and increase the diffusion distance of DiI in fixed tissue. J Neurosci Methods. 2005 Jan 30;141(1):155-63.
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