顯微鏡物鏡的技術(shù)指標(biāo)
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王瓊
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數(shù)值孔徑zui大值為1.4,這個數(shù)值在理論上和技術(shù)上都達(dá)到了極限。目前,有用折射率高的溴萘作介質(zhì),溴萘的折射率為1.66,所以NA 值可大于1.4。
數(shù)值孔徑是顯微鏡物鏡的重要參數(shù),決定了物鏡的分辨率。與物鏡的放大倍數(shù),工作距離,景深有直接關(guān)系。
一般來說,它與分辨率成正比,與放大率成正比,焦深與數(shù)值孔徑的平方成反比,NA值增大,視場寬度與工作距離都會相應(yīng)的變小。
數(shù)值孔徑與分辨率成正比,但這并不是說在選擇物鏡的時候一定要選擇數(shù)值孔徑(NA)zui大才是,因為物鏡還會有很多其他重要參數(shù),比如熒光透過率、工作距離等等,根據(jù)自己的實驗選擇。
焦深
焦深也叫景深,其定義是:指使用顯微鏡觀察和拍攝樣品表面時,從對準(zhǔn)焦點的位置開始,改變物鏡與樣品表面的距離時,對焦能夠保持清晰的范圍。肉眼的調(diào)整能力因人而異,所以焦深也會出現(xiàn)因人而異的情況。現(xiàn)在常用的是與實驗結(jié)果比較一致的Berek 公式。
齊焦距離
齊焦距離是指,對準(zhǔn)焦點時的物鏡鏡體定位面到物體表面的距離。OLYMPUS UIS2/UIS光學(xué)系統(tǒng)物鏡的齊焦距離為45 mm,ZEISS ICCS光學(xué)體統(tǒng)、LEICA HC光學(xué)系統(tǒng)的齊焦距離也是45mm,NIKON CFI 60 光學(xué)系統(tǒng)的齊焦距離是60mm。
工作距離
工作距離也叫物距,即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。
鏡檢時,被檢物體應(yīng)處在物鏡的一倍至二倍焦距之間。因此,它與焦距是兩個概念,平時習(xí)慣所說的調(diào)焦,實際上是調(diào)節(jié)工作距離。在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下,工作距離短孔徑角則大。數(shù)值孔徑大的高倍物鏡,其工作距離小。
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