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實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)技術(shù)服務(wù)

來(lái)源:北京華夏遠(yuǎn)洋科技有限公司   2012年03月10日 22:38  

 

實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)技術(shù)服務(wù)
  
服務(wù)編號(hào)
服務(wù)項(xiàng)目
實(shí)驗(yàn)說(shuō)明
價(jià)格
周期
HX-R1
RNA提取
包括RNA提取、DNase I消化殘留的DNA、RNA電泳
100元/樣品
(樣品大于30個(gè)半價(jià))
2-6個(gè)工作日
HX-R2
反轉(zhuǎn)錄
反轉(zhuǎn)錄、內(nèi)參基因測(cè)試
80元/樣品
(樣品大于30個(gè)半價(jià)
2-6個(gè)工作日
HX-T1
探針合成
探針設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證
2000元/基因
5-10個(gè)工作日
HX-S1
相對(duì)定量-染料法
引物設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證、上機(jī)檢測(cè)、3次實(shí)驗(yàn)重復(fù),數(shù)據(jù)分析。
180元/基因·樣本
(10個(gè)樣品以上起做)
5-15個(gè)工作日
HX-S2
相對(duì)定量-TaqMan探針?lè)?/span>
引物設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證、上機(jī)檢測(cè)、3次實(shí)驗(yàn)重復(fù),數(shù)據(jù)分析
180元/基因·樣本
(10個(gè)樣品以上起做)
5-15個(gè)工作日
HX-S3
定量染料法
引物設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證、上機(jī)檢測(cè)、3次實(shí)驗(yàn)重復(fù),數(shù)據(jù)分析
180元/基因·樣本
(10個(gè)樣品以上起做)
5-15個(gè)工作日
HX-S4
定量TaqMan探針?lè)?/span>
引物設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證、上機(jī)檢測(cè)、3次實(shí)驗(yàn)重復(fù),數(shù)據(jù)分析
180元/基因·樣本
(10個(gè)樣品以上起做)
5-15個(gè)工作日
HX05
構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)品
 PCR擴(kuò)增、純化、OD值檢測(cè)、濃度計(jì)算
600元/基因
2-6個(gè)工作日
HX06
標(biāo)準(zhǔn)曲線
制作標(biāo)準(zhǔn)曲線
800元/基因
2-6個(gè)工作日
 
背景知識(shí):實(shí)時(shí)熒光定量PCRReal-time PCR即通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針對(duì)PCR反應(yīng)過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),根據(jù)PCR指數(shù)擴(kuò)增期間熒光信號(hào)的變化來(lái)即時(shí)測(cè)定對(duì)應(yīng)特異產(chǎn)物的含量,并據(jù)此推斷目的基因的初始量。該方法可以檢測(cè)細(xì)胞、組織或微生物中基因表達(dá)變化,比較不同組織的mRNA表達(dá)差異。如不同藥物濃度處理后相關(guān)基因表達(dá)水平高低變化;驗(yàn)證基因芯片結(jié)果;siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。與常規(guī)PCR(RT-PCR)相比,實(shí)時(shí)熒光定量PCR具有*的靈敏度、高度的重復(fù)性和的特異性。因?yàn)镻CR擴(kuò)增過(guò)程閉蓋操作,避免了反應(yīng)產(chǎn)物的污染,大大提高了結(jié)果的可靠性,現(xiàn)已成為現(xiàn)階段*的核酸分子定量檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn),在基因表達(dá)研究和臨床疾病檢測(cè)等領(lǐng)域已得到廣泛應(yīng)用。
技術(shù)流程
一、RNA的提取
二、DNase I 消化RNA中殘留的DNA
三、瓊脂糖凝膠電泳,判斷RNA的質(zhì)量
四、RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA
五、引物設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證,反應(yīng)體系和反應(yīng)條件優(yōu)化
六、上機(jī)檢測(cè):包括擴(kuò)增曲線、溶解曲線
七、數(shù)據(jù)整理、表達(dá)量計(jì)算、作圖
八、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書寫:包括詳細(xì)的儀器、耗材、試劑、引物信息、反應(yīng)體系、實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)                圖片、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及結(jié)果分析。

送樣要求:細(xì)胞(≥106)、組織(≥100mg)、血液(≥1ml)、葉片(≥100mg)等樣品材料,基因組DNA或總RNA(體積≥20μl,濃度≥50 ng/μl)。外地客戶可以干冰郵寄,北京客戶直接公司取樣。
 
背景資料:客戶提供物種信息、GeneBank號(hào)、目的基因名稱或特異基因的序列。
 
提供結(jié)果:實(shí)驗(yàn)所用所有儀器試劑及耗材、引物序列;RNA電泳圖和PCR特異性電泳圖;詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)過(guò)程;原始數(shù)據(jù)(包括擴(kuò)增曲線和熔解曲線)及數(shù)據(jù)分析結(jié)果。
 
特別聲明:本公司所用熒光定量PCR儀為伯樂(lè)(BIO-RAD)公司儀器,所用耗材為白色低腰八聯(lián)排管,所用試劑為SYBR Green I 的升級(jí)替代產(chǎn)品Eva Green;論文可發(fā)表在國(guó)外任何影響因子的刊物上;實(shí)驗(yàn)中,客戶可以隨時(shí)來(lái)參觀學(xué)習(xí)詢問(wèn);根據(jù)客戶要求每個(gè)反應(yīng)免費(fèi)重復(fù)2-3次。樣本在60個(gè)以上,基因3個(gè)或以上(含內(nèi)參)時(shí),RNA提取和反轉(zhuǎn)錄項(xiàng)目免費(fèi)。
具體優(yōu)惠方式和細(xì)節(jié)您可以來(lái)信或。
 
收款方式:本公司所有科研服務(wù)均收取50%預(yù)付款,實(shí)驗(yàn)完成后,1個(gè)月內(nèi)結(jié)清尾款,

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