手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
水性C18色譜柱是一種專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于在高水相流動(dòng)相條件下工作的反相高效液相色譜（HPLC）柱。它通常用于極性和親水性化合物的分離。以下是水性C18色譜柱的通用使用指南：
1.色譜柱的安裝
檢查與連接：在安裝前確保色譜柱處于良好狀態(tài)，沒(méi)有損壞。使用適配器將色譜柱牢固地連接到HPLC系統(tǒng)中，確保無(wú)泄漏。
沖洗：在初次使用或長(zhǎng)時(shí)間不使用之后，應(yīng)使用純?nèi)軇ㄈ缂状蓟蛞译妫_洗色譜柱，通常以0.5-1.0mL/min的流速進(jìn)行15-30分鐘的沖洗。
2.流動(dòng)相的選擇與制備
高水相流動(dòng)相：由于這是水性C18色譜柱，應(yīng)使用高水相比例的流動(dòng)相，典型的是80%以上的水相。常用的水相包括純水、含有少量緩沖鹽的水溶液（如磷酸鹽緩沖液）。
有機(jī)相助溶劑：常用的有機(jī)相助溶劑包括乙腈或甲醇。根據(jù)目標(biāo)化合物的極性，調(diào)整有機(jī)相比例。
pH調(diào)節(jié)：對(duì)于大多數(shù)分析物，流動(dòng)相的pH值應(yīng)該控制在色譜柱能夠承受的范圍內(nèi)（通常為2-8），并且應(yīng)盡量接近中性以保護(hù)色譜柱。
3.樣品制備
樣品溶劑：樣品應(yīng)溶解在流動(dòng)相中或與流動(dòng)相相似的溶劑中，以減少峰形變差和拖尾現(xiàn)象。
過(guò)濾：樣品溶液應(yīng)通過(guò)0.22μm或0.45μm的濾膜過(guò)濾，以除去顆粒物，防止堵塞色譜柱。
4.操作條件
流速：一般建議在0.5-1.5mL/min的流速范圍內(nèi)操作，根據(jù)具體分析需求調(diào)整。
柱溫：控制柱溫在20-40°C之間，具體溫度根據(jù)分離效果優(yōu)化。
進(jìn)樣量：為避免柱超載，通常推薦進(jìn)樣量在1-20µL范圍內(nèi)，根據(jù)樣品濃度和柱子尺寸調(diào)整。
5.色譜柱的維護(hù)
清洗：定期用高比例有機(jī)溶劑（如乙腈或甲醇）沖洗色譜柱，尤其是在連續(xù)使用后或更換流動(dòng)相前。
儲(chǔ)存：短期存放時(shí)，用流動(dòng)相進(jìn)行沖洗并保持濕潤(rùn)。長(zhǎng)期存放時(shí)，建議用有機(jī)溶劑（如乙腈）沖洗后密封保存。
再生：如果色譜柱性能下降，可以嘗試用梯度沖洗法再生色譜柱，從高水相到高有機(jī)相，再返回高水相，逐步?jīng)_洗。
6.常見(jiàn)問(wèn)題及處理
柱壓升高：檢查流動(dòng)相和樣品是否有顆粒物，必要時(shí)更換過(guò)濾器或預(yù)柱。也可能需要用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱。
峰形變差：檢查樣品溶劑與流動(dòng)相的匹配性，調(diào)整進(jìn)樣量；確保色譜柱沒(méi)有堵塞或老化。
分離度下降：優(yōu)化流動(dòng)相比例、流速和柱溫，或考慮更換色譜柱。
通過(guò)遵循以上指南，可以有效地使用和維護(hù)水性C18色譜柱，確保其最佳性能和長(zhǎng)使用壽命。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心