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實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)服務(wù)
— 華夏遠(yuǎn)洋明星產(chǎn)品
*部分、背景知識(shí)
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real-time PCR）即通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針對(duì)PCR反應(yīng)過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，根據(jù)PCR指數(shù)擴(kuò)增期間熒光信號(hào)的變化來即時(shí)測(cè)定對(duì)應(yīng)特異產(chǎn)物的含量，并據(jù)此推斷目的基因的初始量。該方法可以檢測(cè)細(xì)胞、組織或微生物中基因表達(dá)變化，比較不同組織的mRNA表達(dá)差異。如不同藥物濃度處理后相關(guān)基因表達(dá)水平高低變化；驗(yàn)證基因芯片結(jié)果；siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。與常規(guī)PCR（RT-PCR）相比，實(shí)時(shí)熒光定量PCR具有*的靈敏度、高度的重復(fù)性和的特異性。因?yàn)镻CR擴(kuò)增過程閉蓋操作，避免了反應(yīng)產(chǎn)物的污染，大大提高了結(jié)果的可靠性，現(xiàn)已成為現(xiàn)階段*的核酸分子定量檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，在基因表達(dá)研究和臨床疾病檢測(cè)等領(lǐng)域已得到廣泛應(yīng)用。
第二部分、為何稱之為明星產(chǎn)品？
服務(wù)：
一、 實(shí)驗(yàn)設(shè)備：所用熒光定量PCR儀為伯樂（BIO-RAD）公司儀器；
二、 試劑耗材配備：所用試劑為SYBR Green I 的升級(jí)替代產(chǎn)品Eva Green，*白色低腰八聯(lián)排管；
三、 論文發(fā)表標(biāo)準(zhǔn)：論文可發(fā)表在國(guó)外任何影響因子的刊物上；
四、 參觀學(xué)習(xí)：實(shí)驗(yàn)中，客戶可以隨時(shí)來參觀學(xué)習(xí)詢問；
五、 實(shí)驗(yàn)要求：根據(jù)客戶要求每個(gè)反應(yīng)免費(fèi)重復(fù)2-3次。樣本在60個(gè)以上，基因3個(gè)或以上（含內(nèi)參），RNA提取和反轉(zhuǎn)錄項(xiàng)目免費(fèi)。
第三部分、技術(shù)流程
1、RNA的提取；
2、DNase I 消化RNA中殘留的DNA；
3、瓊脂糖凝膠電泳，判斷RNA的質(zhì)量；
4、RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA；
5、引物設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證，反應(yīng)體系和反應(yīng)條件優(yōu)化；
6、上機(jī)檢測(cè)：包括擴(kuò)增曲線、溶解曲線；
7、數(shù)據(jù)整理、表達(dá)量計(jì)算、作圖；
8、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書寫，包括詳細(xì)的儀器、耗材、試劑、引物信息、反應(yīng)體系、實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)圖片、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及結(jié)果分析。
第四部分、送樣要求
細(xì)胞（≥106）、組織（≥100mg）、血液（≥1ml）、葉片（≥100mg）等樣品材料，基因組DNA或總RNA（體積≥20μl，濃度≥50 ng/μl）。外地客戶可以干冰郵寄，北京客戶直接公司專員取樣。
第五部分、背景資料
客戶提供物種信息、GeneBank號(hào)、目的基因名稱或特異基因的序列。
第六部分、提供結(jié)果
實(shí)驗(yàn)所用所有儀器試劑及耗材、引物序列；RNA電泳圖和PCR特異性電泳圖；詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)過程；原始數(shù)據(jù)（包括擴(kuò)增曲線和熔解曲線）及數(shù)據(jù)分析結(jié)果。
第七部分、服務(wù)內(nèi)容、報(bào)價(jià)、周期
| 服務(wù)編號(hào) | 服務(wù)項(xiàng)目 | 實(shí)驗(yàn)說明 | 價(jià)格 | 周期 |
| HX-R1 | RNA提取 | 包括RNA提取、DNase I消化殘留的DNA、RNA電泳 | 100元/樣品 （樣品大于30個(gè)半價(jià)） | 2-6個(gè)工作日 |
| HX-R2 | 反轉(zhuǎn)錄 | 反轉(zhuǎn)錄、內(nèi)參基因測(cè)試 | 80元/樣品 （樣品大于30個(gè)半價(jià)） | 2-6個(gè)工作日 |
| HX-T1 | 探針合成 | 探針設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證 | 2000元/基因 | 5-10個(gè)工作日 |
| HX-S1 | 相對(duì)定量-染料法 | 引物設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證、上機(jī)檢測(cè)、3次實(shí)驗(yàn)重復(fù)，數(shù)據(jù)分析。 | 180元/基因·樣本 （10個(gè)樣品以上起做） | 5-15個(gè)工作日 |
| HX-S2 | 相對(duì)定量-TaqMan探針法 | 引物設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證、上機(jī)檢測(cè)、3次實(shí)驗(yàn)重復(fù)，數(shù)據(jù)分析 | 180元/基因·樣本 （10個(gè)樣品以上起做） | 5-15個(gè)工作日 |
| HX-S3 | 定量染料法 | 引物設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證、上機(jī)檢測(cè)、3次實(shí)驗(yàn)重復(fù)，數(shù)據(jù)分析 | 180元/基因·樣本 （10個(gè)樣品以上起做） | 5-15個(gè)工作日 |
| HX-S4 | 定量TaqMan探針法 | 引物設(shè)計(jì)、合成、驗(yàn)證、上機(jī)檢測(cè)、3次實(shí)驗(yàn)重復(fù)，數(shù)據(jù)分析 | 180元/基因·樣本 （10個(gè)樣品以上起做） | 5-15個(gè)工作日 |
| HX-05 | 構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)品 | PCR擴(kuò)增、純化、OD值檢測(cè)、濃度計(jì)算 | 600元/基因 | 2-6個(gè)工作日 |
| HX-06 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 800元/基因 | 2-6個(gè)工作日 |
【收款方式：本公司所有科研服務(wù)均收取60%預(yù)付款，實(shí)驗(yàn)完成后，1個(gè)月內(nèi)結(jié)清尾款。具體優(yōu)惠方式和細(xì)節(jié)歡迎您來信或。】
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北京華夏遠(yuǎn)洋科技有限公司
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