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細(xì)胞學(xué)堂 | 超實(shí)用的細(xì)胞培養(yǎng)基知識(shí)盤點(diǎn)
細(xì)胞培養(yǎng)基不僅為細(xì)胞提供必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還為細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖提供適宜的環(huán)境。在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中，選擇合適的培養(yǎng)基是養(yǎng)好細(xì)胞的第一步。
本期細(xì)胞學(xué)堂將為大家詳細(xì)介紹一些特殊的培養(yǎng)基，以及選用時(shí)的相關(guān)指標(biāo)，幫助您快速上手選擇合適的培養(yǎng)基，以滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)基可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完-全培養(yǎng)基和無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基三類。
在去年發(fā)布的干貨中，我們?cè)敿?xì)介紹了關(guān)于MEM、DMEM、RPMI 1640、無(wú)血清培養(yǎng)基等常見(jiàn)培養(yǎng)基，感興趣的可以回顧下。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基主要是指未添加血清的合成培養(yǎng)基以及一些專為特定原代細(xì)胞設(shè)計(jì)的專用基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
無(wú)血清培養(yǎng)基是指通過(guò)添加已知成分的組分（如轉(zhuǎn)鐵蛋白、白蛋白、胰島素等）替代血清，用于特定細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
完-全培養(yǎng)基是指在基礎(chǔ)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加了血清的培養(yǎng)基，可能還含有一些特殊的細(xì)胞生長(zhǎng)因子、抗生素（如雙抗）等。
特殊細(xì)胞培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基，通常需要搭配血清或者血清替代物來(lái)配制成完-全培養(yǎng)基后使用。
由Glen Fischer在美國(guó)國(guó)家癌癥研究所設(shè)計(jì)研制，最初用于小鼠白血病細(xì)胞的培養(yǎng)，現(xiàn)主要用于造血細(xì)胞的培養(yǎng)，如淋巴母細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)。
該培養(yǎng)基含有多種細(xì)胞生長(zhǎng)所需的氨基酸、維生素以及無(wú)機(jī)鹽等成分，不含蛋白質(zhì)、脂類或任何外源性生長(zhǎng)因子。
由William和Gunn共同研制，主要用于大鼠肝上皮細(xì)胞的培養(yǎng)，也可用于其他哺乳動(dòng)物的肝細(xì)胞培養(yǎng)。
該培養(yǎng)基含有多種細(xì)胞生長(zhǎng)所需的氨基酸、維生素以及無(wú)機(jī)鹽等成分，不含蛋白質(zhì)、脂類或任何外源性生長(zhǎng)因子，可以根據(jù)研究需要來(lái)調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖。
MCDB是為特定細(xì)胞設(shè)計(jì)的低蛋白和無(wú)血清培養(yǎng)的培養(yǎng)基，MCDB 131是MCDB培養(yǎng)基的一種，是由Knedler和Ham設(shè)計(jì)開發(fā)出來(lái)的，最初用于培養(yǎng)人微血管內(nèi)皮細(xì)胞（HMVEC）。隨著深入的研究，MCDB 131培養(yǎng)基除用于內(nèi)皮細(xì)胞外，還可用于包括肝細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞在內(nèi)的多種細(xì)胞類型。
MCDB 131培養(yǎng)基不同于傳統(tǒng)培養(yǎng)基之處在于，其含有微量元素、腐胺、腺嘌呤、胸腺嘧啶以及更高濃度的氨基酸和維生素。該培養(yǎng)基在使用時(shí)常與表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、氫化可的松、谷氨酰胺以及低濃度血清搭配使用，血清的添加濃度需根據(jù)細(xì)胞類型而定。
Opti-MEM I 減血清培養(yǎng)基，是一種經(jīng)過(guò)改良的最-低必需培養(yǎng)基，可以在減少50%常規(guī)血清用量的情況下，維持細(xì)胞的正常增殖。這一特性使其在細(xì)胞轉(zhuǎn)染等實(shí)驗(yàn)操作中尤為適用。
01
糖的濃度
高糖培養(yǎng)基通常適合高代謝率及高密度細(xì)胞的培養(yǎng)。
02
酚紅
酚紅是一種酸堿指示劑，用于輔助判斷試劑的pH值變化。酸性環(huán)境下偏黃色，堿性環(huán)境下偏紫色。
03
GlutaMAX
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，是L-谷氨酰胺的升級(jí)版本。L-谷氨酰胺在溶液中容易降解，但L-丙氨酰-L-谷氨酰胺具有良好的穩(wěn)定性，可以作為L(zhǎng)-谷氨酰胺的替代物。
04
鈣、鎂離子
鈣、鎂離子在細(xì)胞培養(yǎng)中有助于細(xì)胞彼此相連，增強(qiáng)細(xì)胞的黏附性，培養(yǎng)懸浮細(xì)胞可選擇無(wú)鈣鎂離子的培養(yǎng)基。
以上是關(guān)特殊細(xì)胞培養(yǎng)基及選用指標(biāo)的介紹，更多細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)干貨，請(qǐng)持續(xù)關(guān)注細(xì)胞學(xué)堂專欄~
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