低聚半乳糖(GOS)是一種功能性低聚糖,嬰兒體內(nèi)的雙歧桿菌菌群的建立很大程度上依賴于母乳中的GOS成分。因此,GOS被廣泛添加到嬰幼兒食品中,以促進(jìn)嬰兒的健康發(fā)育。根據(jù)GB 5009.289-2023,食品中低聚半乳糖的測(cè)定方法是高效液相色譜法。
實(shí)驗(yàn)原理是:試樣中的低聚半乳糖(n為2~7)經(jīng)水溶液提取、2-氨基苯甲酰胺衍生,用淀粉葡糖苷酶酶解去除麥芽糊精、淀粉干擾后,用高效液相色譜-熒光檢測(cè)器檢測(cè)。采集的色譜峰根據(jù)用相同試驗(yàn)條件下液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法確定的相同聚合度的低聚半乳糖的保留時(shí)間定性,采用相對(duì)應(yīng)聚合度和相對(duì)分子質(zhì)量的麥芽糖類聚糖標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)外標(biāo)法定量,扣除乳糖、麥芽糖含量后,得出低聚半乳糖含量。
實(shí)驗(yàn)涉及標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置:
1.標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(10.00mg/mL):分別準(zhǔn)確稱取100mg(精確至0.1mg)的乳糖、麥芽糖、麥芽三糖、麥芽四糖、麥芽五糖、麥芽六糖、麥芽七糖標(biāo)準(zhǔn)品,用水溶解并定容至10mL,混勻。將各標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液轉(zhuǎn)移至儲(chǔ)液瓶中,于4℃保存,保存期1個(gè)月。
2.混合標(biāo)準(zhǔn)中間液(1.000mg/mL):用Miragen電動(dòng)移液器吸取各標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(10.00mg/mL)1.00mL于10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混勻。臨用現(xiàn)配。
3.混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(100.0μg/mL):用Miragen電動(dòng)移液器吸取混合標(biāo)準(zhǔn)中間液(1.000mg/mL)1.00 mL于10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混勻。臨用現(xiàn)配。
4.混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作液:用10mL規(guī)格的Miragen,單吸多排模式設(shè)置設(shè)置3個(gè)體積為1.00、2.50、5.00 mL(程序可存儲(chǔ)和調(diào)用),然后按分液鍵,將3個(gè)體積的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液(1.000mg/mL)分別加入10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混勻;再用5mL規(guī)格的Miragen設(shè)置(或調(diào)用)3個(gè)體積為0.10、1.00、5.00mL,將3個(gè)體積的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(100.0μg/mL)分別加入10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混勻?;旌蠘?biāo)準(zhǔn)系列工作液的質(zhì)量濃度分別為1.000、10.00、50.00,100.0、250.0μg/mL和500.0μg/mL。臨用現(xiàn)配。
移取液體的一般是量筒和移液管,存在三個(gè)缺點(diǎn):一是敞口操作,對(duì)強(qiáng)腐蝕、有毒有害、揮發(fā)性的液體,存在安全隱患;二是操作上環(huán)節(jié)多,需目視確認(rèn)凹液面,實(shí)現(xiàn)精度難以保證;三是效率較低,無法滿足日益增加的液體移取的工作需求。
Miragen電動(dòng)移液器,數(shù)值靠設(shè)定或選定,電機(jī)控制活塞運(yùn)動(dòng),吸液和排液也更加穩(wěn)定,還有步驟少、調(diào)數(shù)快、模式多等諸多優(yōu)勢(shì)。Miragen電動(dòng)移液器可給電機(jī)多段信號(hào),從而達(dá)到吸液和排液分次數(shù)且各段體積可調(diào),可實(shí)現(xiàn)單吸多排、多吸單排等效果,程序還可存儲(chǔ)和調(diào)用,更加可靠、便捷。
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