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二維液相色譜系統(tǒng)是一種高效、高靈敏度的分離分析技術(shù)，廣泛應(yīng)用于復(fù)雜樣品的分離和純化。然而，在實際操作過程中，二維液相色譜系統(tǒng)可能會遇到多種故障，影響實驗的正常進(jìn)行和結(jié)果的準(zhǔn)確性。以下是對常見故障及其解決方法的描述：
1. 壓力異常
- 壓力過高：壓力突然升高通常是由于流路中有堵塞的情況。首先檢查溶劑過濾頭是否堵塞，可以通過用30%的硝酸浸泡或用超純水沖洗來處理。如果問題仍然存在，可能是色譜柱出口端堵塞，需要用強流動相沖洗柱子，或者考慮更換柱子入口篩板。
- 壓力過低：壓力過低的現(xiàn)象一般是由于系統(tǒng)泄漏或泵內(nèi)進(jìn)入了空氣。檢查各個接口處是否有泄漏，并確保泵內(nèi)沒有空氣，可以通過打開Purge閥以3~5ml/min的流速沖洗來排除氣泡。
2. 漂移問題
- 基線漂移：機器啟動時基線容易漂移，通常需要30分鐘的平衡時間。如果實驗過程中發(fā)現(xiàn)基線漂移，可能是由于緩沖溶液或緩沖鹽的使用，或者是在低波長下的平衡時間過長。
- 保留時間漂移：保留時間的變化可能是由于流動相的組成變化、色譜柱的化學(xué)性質(zhì)變化、色譜柱溫度或流速變化等原因引起的。
3. 峰形異常
- 峰形問題：在做液相色譜過程中，峰形問題是常見的問題。對于不同的異常峰，需要區(qū)別對待，通過調(diào)整不同的條件來改善不好的峰形。
4. 泵的問題
- 單向閥污染或閥內(nèi)進(jìn)入氣泡：這會導(dǎo)致柱壓波動范圍很大。處理方法包括使用不同極性的溶劑沖洗，或者拆下進(jìn)出單向閥放在10%的硝酸液內(nèi)超聲清洗。
- 塞桿密封墊磨損：在高壓下壓力不穩(wěn)定，從泵頭滲漏流動相液體，需要更換密封墊。
5. 進(jìn)樣系統(tǒng)問題
- 手動進(jìn)樣器：檢查是否有滲漏，通常是由于污染使轉(zhuǎn)子磨損或用尖頭的針扎進(jìn)手動進(jìn)樣器，劃傷了轉(zhuǎn)子。
- 自動進(jìn)樣器：針密封墊損壞或針污染都可能導(dǎo)致進(jìn)樣量不準(zhǔn)確，需要進(jìn)行清潔或更換。
6. 檢測器問題
- UV燈能量降低：停泵監(jiān)測基線出現(xiàn)短噪音信號并伴有偶爾的長噪音尖信號，需要更換新燈。
- 池內(nèi)氣泡：滯留在池內(nèi)的氣泡使基線一直向一邊漂移且伴有毛刺，可以通過與泵出口直接相連，以2~3mL/min的流速沖洗數(shù)分鐘來解決。
7. 漏夜問題
- 漏夜導(dǎo)致壓力偏低或無壓力：檢查哪個模塊漏夜報錯，清除錯誤后重新啟動泵排查該模塊漏夜位置，未配有漏夜感應(yīng)器的可以逐個接口排查。
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