1、尾尖采血
這是常用且操作簡便的方法之一。首先將小鼠固定并暴露其尾巴,通常將其浸泡在40-50℃的溫水中幾分鐘或用酒精棉球擦拭鼠尾,使血管充盈。然后用無菌手術(shù)刀快速剪去尾尖1-2mm,血液會自然流出。
2、摘眼球采血
用左手拇指、食指和中指抓取小鼠的頸部頭皮,小指和無名指固定尾巴。輕壓需要摘取的眼部皮膚,使眼球充血突出。用眼科剪剪去小鼠的胡須,防止血從胡須處留下引起溶血。用眼科彎鑷夾取眼球并快速摘取,并使血液從眼眶內(nèi)流入0.5ml EP管中。
3、眼眶靜脈叢采血:
此方法適用于多次重復(fù)采血,具有成功率高、死亡率低的優(yōu)點。但需要注意的是,該方法不能采集到無菌的血樣,因為血液中可能混有眼窩內(nèi)的組織液和腺體分泌物。采血后需要一定的組織修復(fù)時間,一般兩次采血間隔應(yīng)為10-14天。
4、心臟采血:
這種方法較為復(fù)雜,需要將小鼠麻醉后仰臥固定于動物臺上,剪去胸前區(qū)被毛,皮膚消毒。使用4-5號針頭的注射器在左側(cè)第3-4肋間心搏動zui強處進針刺入心臟,緩慢回抽針筒以獲取血液樣本。
5、頸靜脈采血:
開始采血之前,我們需要準(zhǔn)備一個特定的頸靜脈保定盒、大鼠頭部固定器。采取特殊位置固定,綁繩固定大鼠二個前肢,另一個人固定大鼠后肢,使大鼠呈現(xiàn)腹部朝上的一個“十”字形,讓大鼠頸部依靠在保定器上,頸部與前肢呈大于90°角,用頭部固定器扭動頸部,使鎖骨出現(xiàn)一個三角窩,注射器沿著腹中線平行方向進針,進針同時回抽注射器出現(xiàn)血液則可抽取相應(yīng)的血量,最后拔出針頭按壓止血。
6、隱靜脈采血:
常用于少量血液采集,無需麻醉。待動物固定后,在后腿外側(cè)區(qū)域剃毛后暴露采血點,用采血針刺入即可獲得血液樣本。
7、頜下靜脈叢采血:
這是一種快速、簡單且人性化的小鼠采血方法,通過面部進針點采集血液。該方法保證順利采集實驗血樣的基礎(chǔ)上將對動物的影響降到zui低。
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