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DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒基礎(chǔ)型使用說(shuō)明書

來(lái)源:上?;菡\(chéng)生物科技有限公司   2024年10月30日 16:20  

產(chǎn)品參數(shù)


試劑組分(WLB8201KITWLB8201KIT48T/盒)
組成規(guī)格數(shù)量功能
A buffer
1.6ml1管主要為穩(wěn)定蛋白/酶,性能的緩沖體系
B buffer0.15ml1管主要為鎂離子等激活體系
正對(duì)照模板

0.1ml

1管主要是陽(yáng)性質(zhì)粒模版為檢驗(yàn)試劑盒的有效性
正對(duì)照引物MIX0.06ml1管
主要是正對(duì)照模版的引物組合
凍干粉試劑8T/排,16T/包3包蛋白/酶體系的試劑工藝:凍干粉、凍干微球

注 Tips:

1. 高溫變性不能有效去除蛋白,可能對(duì)產(chǎn)物分析造成影響;

2. 市場(chǎng)上部分?jǐn)U增產(chǎn)物純化試劑盒不適用,可能造成假陰性結(jié)果。

原理概述 :

本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴(kuò)增技術(shù):在常溫恒溫下(一般為39oC~42oC),在輔助蛋白和單鏈結(jié)合蛋白的幫助下,重組酶和引物形成復(fù)合體;進(jìn)行同源搜索并結(jié)合目的同源域,此時(shí)在該同源位置形成D-loop區(qū)并開始進(jìn)行鏈交換;伴隨著重組酶從復(fù)合體上解離,聚合酶也結(jié)合到引物的3’末端,開始鏈的延伸。

引物設(shè)計(jì) :

建議使用長(zhǎng)度在 30-35 bp 的引物,引物過(guò)短會(huì)影響擴(kuò)增速度和檢測(cè)靈敏度;引物設(shè)計(jì)避免形成二級(jí)結(jié)構(gòu)而影響擴(kuò)增;擴(kuò)增子長(zhǎng)度建議在 150-300 bp,通常不超過(guò) 500 bp。


image.png

由于試劑盒靈敏度非常高,在進(jìn)行反應(yīng)時(shí)請(qǐng)注意避免核酸污染,并設(shè)置空白對(duì)照;(圖片為凝膠電泳法顯示結(jié)果

產(chǎn)品特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì):

本試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、反應(yīng)時(shí)間短(僅需 30 min)等優(yōu)點(diǎn);反應(yīng)組分為干粉狀態(tài),操作簡(jiǎn)便,易于保存。使用金屬浴、水浴鍋等即可進(jìn)行反應(yīng)操作;無(wú)需購(gòu)買 PCR 儀等價(jià)格高昂的設(shè)備。

適用于實(shí)驗(yàn)室級(jí)別的DNA擴(kuò)增以及其他檢測(cè)用途的DNA擴(kuò)增使用。


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