百合種植易感染病蟲害，特別是枯萎病、灰霉病、炭疽病、線蟲病等，不僅嚴(yán)重影響產(chǎn)量，還影響性狀、成分含量及構(gòu)成，經(jīng)查詢農(nóng)業(yè)部百合登記農(nóng)藥數(shù)量較少，故實際種植中存在過量及頻繁疊加品種使用的情況，易造成安全隱患?！吨袊幍洹?020年版四部增訂中藥材與中藥飲片（植物類）中33種禁用農(nóng)藥多殘留測定法及不得檢出的規(guī)定后，未見百合中禁用農(nóng)藥檢出的報道，出現(xiàn)氯蟲苯甲酰胺、代森鋅、腐霉利等農(nóng)殘的檢出?？梢娛袌龊捅O(jiān)管的需求是動態(tài)變化的，順應(yīng)發(fā)展持續(xù)完善中藥材及中藥飲片農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)是十分必要的。

農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB2763-2021）于2021 版始收錄藥食同源物質(zhì)百合的限量標(biāo)準(zhǔn)。研究按照《GB 2763 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》中藥品種限量標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)化原則，擬轉(zhuǎn)化百合項下農(nóng)藥最大殘留限量（MRL），通過以百合常用農(nóng)藥MRL進(jìn)行風(fēng)險評估，確定測定指標(biāo)，考察農(nóng)藥品種的檢測參數(shù)，以《中國藥典》禁用農(nóng)藥多殘留測定法的色譜質(zhì)譜條件建立測定法，測定50批百合樣品作為驗證，完成制定百合中常用農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，為百合農(nóng)藥殘留安全性風(fēng)險管控提供技術(shù)支撐，同時也為探索GB2763轉(zhuǎn)化為中藥標(biāo)準(zhǔn)的模式貢獻(xiàn)數(shù)據(jù)。

針對百合轉(zhuǎn)化農(nóng)藥品種性質(zhì)，分別采用氣質(zhì)聯(lián)用、液質(zhì)聯(lián)用法考察檢測條件及參數(shù)優(yōu)化。當(dāng)離子源溫度為 200℃時百菌清響應(yīng)低，隨著溫度提升至 250℃、290℃時響應(yīng)值趨于穩(wěn)定，結(jié)果表明在一定范圍內(nèi)提升溫度可提高檢測的靈敏度與穩(wěn)定性，最終兼顧共測品種的性質(zhì)，同時以與《中國藥典》2020 年版四部通則 2341 第五法氣質(zhì)法質(zhì)譜參數(shù)盡可能統(tǒng)一的原則，確定檢測方法。同時嘗試在液質(zhì)負(fù)離子模式下完成對百菌清的檢測，通過優(yōu)化參數(shù)可實現(xiàn)測定，但靈敏度及重現(xiàn)性等方面，氣質(zhì)法測定更佳。

分別對百合中 10 種轉(zhuǎn)化農(nóng)藥品種的前處理及測定方法完成考察，建立液質(zhì)法測定 9 個品種、氣質(zhì)法測定 6 個品種的方法，綜合共測品種在相應(yīng)方法中的靈敏度，推薦除百菌清采用氣質(zhì)法測定外其他 9 個品種均可采用液質(zhì)法測定，其中嘧菌環(huán)胺、氟環(huán)唑二者均可，苯醚甲環(huán)唑、啶蟲脒、丙環(huán)唑首選液質(zhì)測定共測方法可作為基質(zhì)干擾或樣品結(jié)果存疑的輔助驗證方法。

在百合空白基質(zhì)篩查中發(fā)現(xiàn)百合樣品普遍存在監(jiān)測農(nóng)藥檢出現(xiàn)象，采用赴湖 南隆山收集新鮮百合、野生百合等方式擴(kuò)大篩查來源，得到不含監(jiān)測農(nóng)藥（峰面 積低于最低校準(zhǔn)濃度峰面積的二分之一）的百合空白基質(zhì)，空白基質(zhì)、對照品及陽性樣品圖譜見下圖。同時從市場購買百合炮制品蜜百合，增加篩查范圍，為明確百合農(nóng)殘狀況提供基礎(chǔ)。

1.空白基質(zhì)     2.陽性樣品     3.基質(zhì)混合對照品

樣品、對照品溶液的 GC-MSMS（左）與 LC-MSMS（右）典型 TIC 圖譜

各農(nóng)藥及內(nèi)標(biāo)化合物保留時間、監(jiān)測離子對及碰撞電壓（CE）參考值

百合部分農(nóng)藥定量下限MRM色譜圖

難點：LCMSMS部分部分化合物出峰時間較早，溶劑效應(yīng)較為明顯，色譜峰出現(xiàn)分叉峰，影響定量及結(jié)果判定，在研究中，建標(biāo)專家使用島津LC-40系列特色功能Co-injection（共同注入進(jìn)樣模式）有效改善了峰形。

按照課題組轉(zhuǎn)化原則，研究所有樣品為收集自市場及種植地，覆蓋多產(chǎn)地多基源的 50 批百合樣品，包括湖南、江西、甘肅等產(chǎn)地，野生百合、甘肅地方標(biāo)準(zhǔn)收載的百合及炮制品蜜百合，一定范圍內(nèi)確保建立方法的兼容性。采用擬定方法檢測，百合中常用農(nóng)藥檢出率相對較高，包括丙環(huán)唑、吡唑醚菌酯、苯醚甲環(huán)唑等，大多數(shù)樣品的農(nóng)藥殘留量處于較低水平，吡唑醚菌酯、苯醚甲環(huán)唑存在超標(biāo)現(xiàn)象。

樣品農(nóng)藥殘留量結(jié)果

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)化原則，基于上述標(biāo)準(zhǔn)限量和檢測方法科學(xué)性、準(zhǔn)確性驗證結(jié)果，完成標(biāo)準(zhǔn)適用性評估。最終將 GB2763 中百合（干）中本研究方法可實現(xiàn)共測的 10 種農(nóng)藥殘留限量轉(zhuǎn)化為百合藥品農(nóng)殘限量。