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一文詳解類器官培養(yǎng)專用基質(zhì)膠!

來(lái)源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2024年11月29日 08:40  

2024年10月10日國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心(簡(jiǎn)稱CDE)在其發(fā)布了《模型引導(dǎo)的罕見病藥物研發(fā)技術(shù)指導(dǎo)原則(征求意見稿)》并予以公示,為制定對(duì)應(yīng)國(guó)家指導(dǎo)性標(biāo)準(zhǔn)來(lái)廣泛聽取各界意見和建議。在征求意見稿內(nèi)提到:非臨床研究數(shù)據(jù)包括但不限于基因、分子、細(xì)胞、類器官、器官芯片、動(dòng)物研究數(shù)據(jù)等。其中提到基于類器官和器官芯片所獲得的數(shù)據(jù)也能作為非臨床研究數(shù)據(jù)的來(lái)源之一。

 

類器官(organoids)是指一種利用干細(xì)胞、祖細(xì)胞等在體外培養(yǎng)出的3D細(xì)胞培養(yǎng)物并具有一定的空間結(jié)構(gòu)組織類似物。2021年,類器官技術(shù)被列為“十四五”國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)專項(xiàng)[1],作為疾病模型,相比于傳統(tǒng)2D疾病模型,類器官在闡明疾病的發(fā)展、穩(wěn)態(tài)性和發(fā)病機(jī)理等與體內(nèi)環(huán)境更加接近,在多領(lǐng)域?qū)l(fā)揮重要,諸如細(xì)胞治療、藥物研發(fā)、基因工程、免疫研究、組織再生等領(lǐng)域?;|(zhì)膠作為類器官和3D培養(yǎng)的重要載體,在其中發(fā)揮著舉足輕重的作用。

 


圖.資料源自CDE

 

基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長(zhǎng)因子。在室溫條件下,基質(zhì)膠聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì),能模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能,有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化。翌圣生物開發(fā)生產(chǎn)的Ceturegel® Matrix基質(zhì)膠不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),超低內(nèi)毒素含量,包括基本濃度、高濃度、低生長(zhǎng)因子和干細(xì)胞和類器官專用不同類型的基質(zhì)膠。

 

 

應(yīng)用方向

 

 

 
產(chǎn)品特點(diǎn)
 
  • 安全性高:不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒);

  • 濃度多樣性:濃度范圍在8~20 mg/mL之間;

  • 批次穩(wěn)定性好:嚴(yán)格生產(chǎn)質(zhì)檢過(guò)程保證批次間性能穩(wěn)定;

  • 低內(nèi)毒素:內(nèi)毒素含量<8 EU/mL;

  • 污染物檢測(cè): 經(jīng)檢測(cè)無(wú)支原體和細(xì)菌、真菌殘留;

  • 產(chǎn)量高:產(chǎn)量在50L/月以上;

  • 兼容性好:可與任何類型的細(xì)胞培養(yǎng)基兼容。

 

 
基于腫瘤樣本應(yīng)用驗(yàn)證
 
01

樣本培養(yǎng)對(duì)比結(jié)果

樣本編號(hào)

癌種

類器官數(shù)量(個(gè))

類器官平均直徑(μm)

培養(yǎng)結(jié)果

是否一致

實(shí)驗(yàn)組

對(duì)照組

實(shí)驗(yàn)組

對(duì)照組

實(shí)驗(yàn)組

對(duì)照組

CRC-Y-002

腸癌

20400

21600

124.03

127.45

成功

成功

LC-Y-001

肺癌

34800

36000

109.26

110.39

成功

成功

 

02

樣本病理鑒定對(duì)比結(jié)果

序號(hào)

樣本編號(hào)

癌種

樣本類型

HE&結(jié)果

1

CRC-Y-002

腸癌

組織&PDO

一致

2

LC-Y-001

肺癌

組織&PDO

一致

 

03

樣本免疫組化對(duì)比結(jié)果

 

04

樣本基因檢測(cè)結(jié)果

編號(hào)

癌種

組織獨(dú)--有突變

類器官獨(dú)--有突變

共有突變

組織突變

類器官突變

組織共有突變占比(%)

類器官共有突變占比(%)

標(biāo)準(zhǔn)偏差(%)

CRC-Y-002

腸癌

16

23

159

175

182

90.86

87.36

1.75

LC-Y-001

肺癌

24

14

158

182

172

86.81

91.86

2.52

 

05

樣本藥敏檢測(cè)結(jié)果

序號(hào)

樣本

對(duì)照組

實(shí)驗(yàn)組

結(jié)果判定

IC50

敏感性

IC50

敏感性

CRC-Y-002

腸癌

2.10

耐藥

3.94

耐藥

真陰性TN

1.64

耐藥

3.19

耐藥

真陰性TN

1.76

耐藥

1.11

耐藥

真陰性TN

LC-Y-001

肺癌

0.50

敏感

0.33

敏感

真陽(yáng)性TP

0.08

敏感

0.30

敏感

真陰性TN

7.80

耐藥

5.09

耐藥

真陰性TN

注:以上數(shù)據(jù)均為翌圣生物委托第三方獨(dú)立合規(guī)機(jī)構(gòu)做的對(duì)比實(shí)驗(yàn)測(cè)定

 

 
FAQ
 

1、拿到的基質(zhì)有色差的變化(淡黃色到深紅色)是什么原因?

對(duì)于含酚紅的基質(zhì)膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會(huì)減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使基質(zhì)膠分散均勻。

 

2、基質(zhì)膠的操作要注意哪些事項(xiàng)?

所有操作需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,應(yīng)使用預(yù)冷的器材以保證基質(zhì)膠正常操作。

 

3、基質(zhì)膠的如何分裝凍存使用?

可將凍融后的Ceturegel® Matrix基質(zhì)膠分裝在多個(gè)凍存管,凍存管需預(yù)冷,分裝后迅速冷凍并保存,避免多次凍融。

 

 
相關(guān)產(chǎn)品
 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

40191ES08/10

5/10 mL

Cebrary® Intestinal Cancer Organoid Growth Medium (Human) 腸癌類器官生長(zhǎng)培養(yǎng)基

41427ES50/60/76

50/l00/500mL

Cebrary® Lung Cancer Organoid Growth Medium (Human)  肺癌類器官生長(zhǎng)培養(yǎng)基

41431ES50/60/76

50/l00/500mL

Cebrary®Cell recovery solution for Organoid類器官回收液

41421ES30/60

30/100 mL

Cebrary®Cell freezing medium for Organoid 類器官凍存液

41422ES30/60

30/100 mL

ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit ATP Luminescent 細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒

40210ES10/60

10/100 mL



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