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摘要：

在復(fù)雜注射劑的研發(fā)和制劑開發(fā)中，處方篩選至關(guān)重要，它直接關(guān)系到藥物的有效性、穩(wěn)定性和安全性。本文主要介紹了 LUMiSizer穩(wěn)定性分析設(shè)備在處方篩選中的作用，如快速進行處方篩選，以節(jié)省研發(fā)時間，并通過兩個案例進行了具體分析。在脂肪乳劑的案例中，LUM系列穩(wěn)定性分析儀可快速、直接地表征其在原濃度下的穩(wěn)定性，加速和自然重力條件下的分離行為一致，透光率圖譜與目視結(jié)果和長期存放結(jié)果匹配，且附加粒徑測試功能與 LD/DLS 結(jié)果匹配，符合穩(wěn)定性測試多項標準。在基于丙交酯乙交酯共聚物（PLGA）納米膠囊的蒽醌衍生物用于光動力治療的研究中，LUMiSizer 可分析 NC（可生物降解聚合物納米膠囊） 分散體的穩(wěn)定性，為該研究提供了有力支持。

關(guān)鍵詞：處方篩選，穩(wěn)定性分析，LUM

LUM應(yīng)用到處方篩選中，可以進行顆粒分析：LUM 可準確測量藥物顆粒大小和分布，對優(yōu)化制劑溶解性和穩(wěn)定性至關(guān)重要。例如，發(fā)現(xiàn)顆粒過大影響溶解性時，可調(diào)整制劑工藝減小顆粒尺寸，提高藥物溶解性和生物利用度。制劑穩(wěn)定性評估：LUM 可監(jiān)測制劑在不同條件下的穩(wěn)定性，及時發(fā)現(xiàn)潛在問題并采取措施改進。如發(fā)現(xiàn)制劑儲存中出現(xiàn)顆粒聚集，可調(diào)整輔料解決穩(wěn)定性問題。以及處方優(yōu)化：基于 LUM 提供的信息，選擇合適輔料和制備工藝，提高制劑性能和質(zhì)量。接下來通過兩篇文獻來重點探討LUM穩(wěn)定性分析設(shè)備在處方篩選中的作用。

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處方篩選可以確保藥物穩(wěn)定性。例如，對于易氧化的藥物可添加抗氧化劑，對pH敏感的藥物選擇合適緩沖體系，防止在儲存和使用中發(fā)生降解、氧化、水解等反應(yīng)。優(yōu)化藥物釋放特性。如通過選擇高分子材料作為緩釋載體控制釋放速度，延長作用時間；利用脂質(zhì)體、納米粒等載體技術(shù)實現(xiàn)靶向輸送，提高療效并降低副作用。提高藥物生物利用度。例如，采用微乳、納米混懸液等技術(shù)增加難溶性藥物溶解度；為蛋白質(zhì)、多肽等生物大分子藥物選擇合適保護劑和穩(wěn)定劑，防止體內(nèi)降解。降低副作用風險。控制藥物釋放速度可避免突釋現(xiàn)象，減少對局部組織刺激；選擇低毒性輔料降低制劑整體毒性。適應(yīng)特殊給藥需求。對于眼部注射劑，選擇對眼部無刺激性輔料并確保藥物在眼部保持適當濃度和作用時間；腦部注射劑需選擇能穿越血腦屏障的載體材料實現(xiàn)靶向輸送。提高制劑可制造性。選擇合適輔料和制備工藝確保制劑穩(wěn)定性和一致性，便于大規(guī)模生產(chǎn)，同時降低成本提高市場競爭力。

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按照GB∕T41316-2022 TR 13097 分散體系穩(wěn)定性表征指導(dǎo)原則，穩(wěn)定性是指分散體系在條件或類似條件下貯存和使用一段時間后,穩(wěn)定性指標保持閾值范圍內(nèi)的能力。因此,穩(wěn)定性指標取決于其應(yīng)用。對于特別穩(wěn)定的產(chǎn)品,為了獲取預(yù)定的穩(wěn)定性判據(jù),需要使用高分辨率或敏感的分析技術(shù),也可以使用加速變化的方法。

穩(wěn)定性參數(shù)可分為：分散相的質(zhì)量濃度或體積濃度、連續(xù)相的狀態(tài)（如:密度、黏度、表面張力、化學(xué)勢、溶劑質(zhì)量）、分散相的狀態(tài)（如:粒徑、粒形和密度分布,液滴的黏度、顆粒形變、顆粒表面結(jié)構(gòu)）、顆粒/液滴間相互作用力（如:靜電力和范德華力、空間阻力和耗散力）、分散相和連續(xù)相間相互作用；分散體系可能會發(fā)生團聚、聚并、乳析、絮凝、上浮、沉降、奧氏熟化、相轉(zhuǎn)化等穩(wěn)定性喪失現(xiàn)象?？刹捎媚繙y法、儀器法、關(guān)聯(lián)法等方法對分散體系狀態(tài)變化進行表征。

根據(jù)《中國藥典2020版》《9001 原料藥物與制劑穩(wěn)定性試驗指導(dǎo)原則》，穩(wěn)定性試驗的目的是考察原料藥物或制劑在溫度、濕度、光線的影響下隨時間變化的規(guī)律，為藥品的生產(chǎn)、包裝、貯存、運輸條件提供科學(xué)依據(jù)，同時通過試驗建立藥品的有效期。

穩(wěn)定性試驗的基本要求是：（1）穩(wěn)定性試驗包括影響因素試驗、加速試驗與長期試驗。影響因素試驗用1批原料藥物或1批制劑進行；如果試驗結(jié)果不明確，則應(yīng)加試2個批次樣品。生物制品應(yīng)直接使用3個批次。…… 4）研究藥物穩(wěn)定性，要采用專屬性強、準確、精密、靈敏的藥物分析方法與有關(guān)物質(zhì)（含降解產(chǎn)物及其他變化所生成的產(chǎn)物）的檢查方法，并對方法進行驗證，以保證藥物穩(wěn)定性試驗結(jié)果的可靠性。在穩(wěn)定性試驗中，應(yīng)重視降解產(chǎn)物的檢查。……（7）制劑質(zhì)量的“顯著變化”通常定義為：①含量與初始值相差5%；或釆用生物或免疫法測定時效價不符合規(guī)定。②降解產(chǎn)物超過標準限度要求。③外觀、物理常數(shù)、功能試驗（如顏色、相分離、再分散性、粘結(jié)、硬度、每撳劑量）等不符合標準要求。④pH值不符合規(guī)定。⑤12個制劑單位的溶出度不符合標準的規(guī)定。

需要指出的是：本文中所述及的穩(wěn)定性分析和藥典中的穩(wěn)定性分析概念不相同。

LUMiSizer全功能的分散體分析儀（德國LUM公司），采用離心分離分析方法來預(yù)測制劑的穩(wěn)定性。使用STEP技術(shù)（空間、時間消光圖譜），對樣品的整體空間范圍用平行近紅外或藍光照射，通過光學(xué)傳感器CCD檢測透光率以獲得空間和時間消光圖譜，從而快速表征分散體系（乳液或懸浮液）中的不穩(wěn)定現(xiàn)象，如漂浮或沉降等，來預(yù)測制劑的穩(wěn)定性。

使用LUMiSizer測試穩(wěn)定性，比用肉眼在自然重力下觀察試管的分離過程快2000多倍。只需數(shù)分鐘或數(shù)小時，而不是幾個月或幾年，就能完成分散體在原始濃度下的快速穩(wěn)定性排序和貨架期預(yù)測，獲得的結(jié)果與正常重力下的結(jié)果一致。可以很輕松的檢測出沉積層和網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)顆粒的可壓縮性。

需要注意的是，LUMiSizer 設(shè)備是通過STEP技術(shù)，測量透射光強度、離心場速度分布和顆粒尺寸分布等，關(guān)注的是分散體系中顆?；蛳鄳B(tài)之間的相互作用，在物理層面（如顆粒的運動、分布等）的穩(wěn)定性。這里的穩(wěn)定性概念不同于藥物分析中的穩(wěn)定性，藥物分析中的穩(wěn)定性是采用多種分析方法和技術(shù)手段，來評估藥物的化學(xué)組成、雜質(zhì)情況、物理穩(wěn)定性、微生物穩(wěn)定性等。

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脂肪乳作為新的載藥劑型，具有諸多優(yōu)點，比如：對于易氧化的藥物，脂肪乳可添加抗氧化劑，確保藥物穩(wěn)定性，可以提高療效并降低副作用，可以適應(yīng)特殊給藥需求等等。許多藥物以其為載體。是一種新型快速、短效靜脈麻醉藥，常制成脂肪乳劑。影響脂肪乳劑穩(wěn)定性的因素眾多，包括原料選擇、處方篩選、制備工藝、物理和熱力學(xué)影響、液滴大小和分布、包裝材料、儲存條件等[1]。

問題：

在對脂肪乳劑進行生產(chǎn)工藝調(diào)整后，其制備的乳劑幾個月內(nèi)變得不穩(wěn)定，但激光衍射（LD）和動態(tài)光散射（DLS）分析未發(fā)現(xiàn)“新鮮樣品”與之前的差別。幾個月后用LD、DLS測試發(fā)現(xiàn)粒徑有變化，但這些方法發(fā)現(xiàn)問題較晚，需要長達數(shù)月才能發(fā)現(xiàn)問題。因此需要盡早對產(chǎn)品進行可靠的穩(wěn)定性表征，以避免生產(chǎn)浪費、批次召回和利潤損失等危機。

使用設(shè)備：

LUMiReader PSA穩(wěn)定性分析儀（靜置型），測試條件：1g，38h，25℃。

LUMiSizer穩(wěn)定性分析儀（加速型），測試條件：2300g，2h，25℃。

結(jié)果：

圖1是，同一個脂肪乳劑樣品在LUMiReader PSA®里靜置38h后與在LUMiSizer®里加速測量2h后（對底部進行了局部放大）的透光率圖譜比較。橫坐標對應(yīng)的是樣品管的位置，左邊是樣品管的頂部，右邊是樣品管的底部；縱坐標是透光率數(shù)值。

同一個脂肪乳劑在不同的測試儀器/條件下，均出現(xiàn)液滴上浮導(dǎo)致底部透光率升高的現(xiàn)象，且圖譜性質(zhì)和趨勢一致，說明加速條件適用于該樣品測試。

圖2是脂肪乳劑在LUMiSizer®里加速測量2h后的透光率圖譜與實物照片的比較。脂肪乳劑在加速測量中出現(xiàn)典型的多分散上浮現(xiàn)象，與肉眼觀察一致。

圖3是用LUMiSizer®定量比較不同批次脂肪乳劑的上浮速度；基準樣品的上浮速度最慢，穩(wěn)定性最好；生產(chǎn)工藝調(diào)整后數(shù)月內(nèi)不穩(wěn)定的樣品上浮速度最快，最不穩(wěn)定。

圖4是不同批次的1：20比例稀釋后的脂肪乳劑在LUMiSizer®里測試得的液滴平均粒徑的比較。生產(chǎn)工藝調(diào)整后不穩(wěn)定的樣品平均粒徑最小，推測是較小納米顆粒的布朗運動劇烈導(dǎo)致樣品更不穩(wěn)定，且粒徑與穩(wěn)定性不存在直接聯(lián)系。影響穩(wěn)定性的因素很多，粒徑是其中之一。

結(jié)果與討論：

LUM系列穩(wěn)定性分析儀可快速、直接地表征脂肪乳劑在原濃度下的穩(wěn)定性，加速和自然重力條件下的分離行為一致，透光率圖譜與目視結(jié)果一致，與長期存放結(jié)果匹配。LUMiSizer附加粒徑測試功能，與LD/DLS結(jié)果匹配，符合穩(wěn)定性測試多項標準，滿足藥企的21 - CFR - Part和GLP認證。

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背景：

光動力療法（PDT）是一種基于單色可見光和光敏劑化合物組合的治療協(xié)議，用于治療許多皮膚疾病，現(xiàn)已擴展到包括醫(yī)美等領(lǐng)域，然而，一些光敏劑藥物水溶性差且具有毒性，使用生物技術(shù)和納米技術(shù)開發(fā)獲取具有生物相容性的光活性化合物。PDT 的機制是光敏劑分子在特定波長的可見光照射下，引發(fā)一系列光化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生自由基、單線態(tài)氧和活性氧物種（ROS），從而破壞目標組織。獲得新的光敏分子的生物技術(shù)途徑為制藥行業(yè)提供了一種可行且經(jīng)濟的選擇，本研究旨在開發(fā)和表征一種含有蒽醌衍生物的可生物降解聚合物納米膠囊（NC）作為新的光敏劑[2]。

材料與方法：

制備納米膠囊：根據(jù) Fessi 等人的方法并進行修改，通過納米沉淀或界面沉積預(yù)制聚合物的方法制備 NC，將含有磷脂、油、共聚物 PLGA 和紅色染料蒽醌（RD）的有機相加入含有非離子表面活性劑的水相中，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機溶劑。

表征項目：

粒徑、多分散指數(shù)（PdI）和 Zeta 電位；原子力顯微鏡（AFM）分析；吸收和熒光發(fā)射光譜 UV/Vis 測試；熒光壽命光譜測試；細胞培養(yǎng)、細胞毒性測試；體外光動力治療測試等。

加速穩(wěn)定性測試（LUMiSizer）

在采用STEP技術(shù)（空間和時間分辨消光曲線）的分散分析儀LUMiSizer上，分析NC分散體的穩(wěn)定性。該研究同時記錄了作為時間和空間的函數(shù)的透射光強度（在880 nm處）。

測量在25℃下進行；在3618 rpm的轉(zhuǎn)速下，每65秒采集一條譜線，持續(xù)476分鐘，半徑位置為129.5 mm。

在分析離心過程中，通過穩(wěn)定性分析，用空載/NC（A）和RD/NC（B）獲得的歸一化NIR透射曲線，進行對比分析。第一條和最后一條透光率譜線分別以紅色和綠色顯示。

圖5. Unloaded/NC、RD/NC 穩(wěn)定性分析譜圖

表1.Unloaded/NC、RD/NC 分散速度

結(jié)果：

從上圖分析可知，加載 RD 后 NC 的穩(wěn)定性未改變，RD/NC 的速度分布比未負載的 / NC 窄，在分散體系中，速度分布反映了顆粒的運動狀態(tài)，較窄的速度分布表明顆粒的運動速度相對集中在一個較小的范圍內(nèi)，顆粒相對更均一，從而推測RD 封裝可以提高 NC 配方的穩(wěn)定性。通過指紋譜圖及速度分布綜合評估產(chǎn)品穩(wěn)定性，及預(yù)估效期。

LUMiSizer能夠快速表征分散系統(tǒng)（乳液或懸浮液）的不穩(wěn)定性現(xiàn)象，如上浮或沉降。沉淀。通過LUMiSizer測量的速度示于表1中，從而表征RD/NC 和Unloaded/ NC的分散穩(wěn)定性。

該分析儀的結(jié)果為進一步研究和應(yīng)用基于 PLGA 納米膠囊的蒽醌衍生物用于光動力治療提供了有力支持。

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處方篩選能確保藥物穩(wěn)定性、優(yōu)化藥物釋放特性、提高藥物生物利用度、降低副作用風險、適應(yīng)特殊給藥需求以及提高制劑可制造性。隨著藥物研發(fā)的不斷發(fā)展，對處方篩選的要求將越來越高。LUM 設(shè)備通過STEP技術(shù)，可快速、直接地評估產(chǎn)品穩(wěn)定性，從而評估藥物效期，大大提高處方篩選效率，為藥物研發(fā)提供更可靠的支持。