(2) 成年角化細(xì)胞的體外培養(yǎng)和擴(kuò)增容易，適合自體和同種異體細(xì)胞治療產(chǎn)品。

(3) 之前限制：成年角化細(xì)胞缺乏高效的轉(zhuǎn)染方法。

(4) 本研究目標(biāo)：開(kāi)發(fā)符合GMP標(biāo)準(zhǔn)的、可擴(kuò)展的細(xì)胞工程流程，使用MaxCyte^®電穿孔技術(shù)轉(zhuǎn)染來(lái)自四個(gè)不同解剖位置的新生兒和成年原代角化細(xì)胞。

實(shí)驗(yàn)流程

主要發(fā)現(xiàn)

• 使用MaxCyte技術(shù)，高效地將mRNA或CRISPR-Cas9核糖核蛋白 (RNPs) 傳遞給原代角化細(xì)胞，不損害細(xì)胞活性、形態(tài)或生長(zhǎng)能力。

上圖：使用MaxCyte ATx電轉(zhuǎn)儀對(duì)原代包皮角化細(xì)胞進(jìn)行mRNA-GFP或ATTO550標(biāo)記的CRISPR RNPs電穿孔后的流式細(xì)胞儀分析結(jié)果，顯示了高效的轉(zhuǎn)染效率。

上圖：使用CCR5靶向CRISPR RNP電穿孔后的原代角化細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線(xiàn)，電轉(zhuǎn)后細(xì)胞增殖幾乎不受影響。

上圖：使用MaxCyte ATx儀器對(duì)來(lái)自不同解剖位置的原代皮膚成纖維細(xì)胞、扁桃體來(lái)源的口腔角化細(xì)胞和鼓膜 (中耳) 角化細(xì)胞進(jìn)行ATTO 550標(biāo)記的CRISPR RNPs電穿孔后的流式細(xì)胞儀分析結(jié)果，顯示了高效的轉(zhuǎn)染效率。

• 單次電穿孔可實(shí)現(xiàn)高效的多重基因編輯，簡(jiǎn)化了流程。

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   上海昊擴(kuò)科學(xué)器材有限公司成立于2019年，總部位于上海，是一家實(shí)驗(yàn)室設(shè)備/耗材及分析儀器的專(zhuān)業(yè)服務(wù)商。公司致力于為生物、醫(yī)藥、物性檢測(cè)、化工分析、食品、工業(yè)生產(chǎn)等相關(guān)領(lǐng)域客戶(hù)提供國(guó)內(nèi)外高科技專(zhuān)業(yè)設(shè)備以及技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)。