通常而言,無血清培養(yǎng)基包括了無血清培養(yǎng)基、無蛋白無血清培養(yǎng)基、無動物來源的無血清培養(yǎng)基、化學(xué)成分限定培養(yǎng)基等類型。
一、無血清培養(yǎng)基分類
1. 無血清培養(yǎng)基:是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基里補充了一些添加物,包括人激素、牛的轉(zhuǎn)鐵蛋白、牛血清白蛋白等,廣泛的應(yīng)用于多種細胞系的培養(yǎng),比如造血細胞系的培養(yǎng);
2. 無蛋白無血清培養(yǎng)基:該類培養(yǎng)基wanquan不含有血清和動物來源的蛋白,但仍包含來源于植物蛋白的水解物或合成多肽片段等其他衍生物。由于所含蛋白極低,并且蛋白成分明確,有利于重組蛋白的下游生產(chǎn)、分離和純化,總體成本也會大幅度下降。但其通用性較差,需要針對目標(biāo)細胞株進行特異性的優(yōu)化。目前主要應(yīng)用于生命科學(xué)研究和基因工程藥物開發(fā)等領(lǐng)域;
3. 無動物來源的無血清培養(yǎng)基:是指以基礎(chǔ)培養(yǎng)基配制的培養(yǎng)液無需添加牛血清,且該培養(yǎng)基成分中不含有任何動物來源成分,即可培養(yǎng)細胞和維持生長。僅采用蛋白水解物、重組蛋白或其他化學(xué)物質(zhì)來取代動物源蛋白。它既可以滿足細胞生長及增殖的需要,還能夠降低培養(yǎng)基的生產(chǎn)成本,提高重組蛋白類藥物安全性。目前主要應(yīng)用于生物藥品的研發(fā)和生產(chǎn)中。比如CHO細胞、293細胞、Vero細胞、C6細胞等;
4. 化學(xué)成分限定培養(yǎng)基:此類培養(yǎng)基wanquan無血清、無蛋白,成分wanquan明確,可以保證培養(yǎng)基批次間的一致性。它不但有利于跟蹤細胞培養(yǎng)的代謝情況,而且在后續(xù)的分離純化中也非常方便,是目前最為安全和理想的培養(yǎng)基??墒遣⒎撬械募毎寄茉诨瘜W(xué)成分限定培養(yǎng)基中達到較高的表達水平,需要研究者和使用者根據(jù)具體的用途不斷改進設(shè)計方案和配方。
二、無血清培養(yǎng)基特點
優(yōu)點 | (1)無血清培養(yǎng)基不含血清,提高了實驗的重復(fù)性、準確性和穩(wěn)定性; (2)避免了血清所帶來的血源性污染等問題,減少血清未知成分對細胞的損傷; (3)相比于含有血清的培養(yǎng)基,大大簡化了生產(chǎn)過程; (4)無血清培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)來源于重組蛋白或蛋白水解產(chǎn)物,提高了實驗效率; (5)無血清培養(yǎng)基的成分和含量相對明確,能提高細胞產(chǎn)品的質(zhì)量并有利于產(chǎn)物的分離提純。 |
缺點 | (1)無血清培養(yǎng)基的生產(chǎn)成本較高,不利于商業(yè)化開發(fā)與應(yīng)用; (2)多數(shù)無血清培養(yǎng)基的應(yīng)用不廣泛,通用性較低,不具有普遍性; (3)細胞在無血清培養(yǎng)基中,對外界條件如物理和化學(xué)等因素的改變較敏感; (4)目前低血清培養(yǎng)基研究開發(fā)的相關(guān)數(shù)據(jù)缺乏在線交流,可查閱的資料有限,不能有效促進細胞“馴化”技術(shù)的發(fā)展。 |
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