一、試驗(yàn)原理:
用于快速鑒別念珠菌。根據(jù)酶底物法,通過(guò)顯色區(qū)別不同念珠菌,25-30℃培養(yǎng)48小時(shí),白色念珠菌顯綠色,熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母顯紫粉色,其他念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。
二、培養(yǎng)基配方(g/L):
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(蛋白胨等) | 30.0 |
色素 | 3.4 |
氯霉素 | 0.1 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 6.0±0.2 25℃ |
三、試驗(yàn)方法:
1. 稱(chēng)取本品9.7g(可按4.85g/100ml的比例擴(kuò)大或縮?。尤?00ml蒸餾水或純化水中,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過(guò)1分鐘。將加熱后的培養(yǎng)基水浴冷卻至45-50℃,輕輕地?fù)u勻,傾入無(wú)菌平皿,備用
2. 制備好的平板保存于2-8℃,應(yīng)避免光線(xiàn)直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,室溫保存。
3. 使用前,把制備好的平板放置室溫10-20分鐘。
4. 制備質(zhì)控菌液
5. 取一環(huán)質(zhì)控菌液劃線(xiàn)接種到念珠菌顯色培養(yǎng)基上。
6. 25-30℃倒置培養(yǎng)基培養(yǎng)48-72小時(shí),記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
四、結(jié)果觀察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株,25-30℃倒置培養(yǎng)基培養(yǎng)48-72小時(shí):
質(zhì)控菌株 | 菌株編號(hào) | 生長(zhǎng)情況 | 其他特征 |
白色念珠菌 | CMCC(F)98001 | +++ | 綠色菌落 |
熱帶念珠菌 | / | +++ | 藍(lán)灰色菌落 |
克柔氏假絲酵母菌 | / | +++ | 紫紅色菌落 |
光滑念珠菌 | / | +++ | 淡紫色至紫色菌落 |
其他念珠菌 | / | +++ | 白色菌落 |
大腸埃希氏菌 | ATCC25922 | - | / |
圖1 念珠菌顯色培養(yǎng)基微生物質(zhì)控結(jié)果
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