植物類黃酮(Flavonoid)試劑盒說明書
微量法 100T/96S
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:
類黃酮是一類多苯化合物,屬于植物次生代謝物,對人體具有消炎,抗菌,降血脂,清除體內(nèi)羥自由基,預防癌癥等作用。
測定原理:
在堿性亞硝酸鹽溶液中,類黃酮與鋁離子形成在 510nm 處有特征吸收峰的紅色絡合物,測定樣品提取液在 510nm 處的吸光值,即可計算樣品類黃酮含量。
組成:
產(chǎn)品名稱 | BD6004-100T/48S | Storage |
提取液: | 60%乙醇,自備 | 4℃ |
試劑一:液體 | 1ml | 4℃ |
試劑二:液體 | 1ml | 4℃ |
試劑三:液體 | 10ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
自備儀器和用品:
天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水。
類黃酮提?。?/span>
將樣本烘干至恒重,粉碎,過 40 目篩之后,稱取約 0.02g,加入 2ml 提取液,60℃振蕩提取 2h,10000g, 25℃,離心 10min,取上清待測。
測定操作表
1、分光光度計/酶標儀預熱 30min,調(diào)節(jié)波長至 500nm,蒸餾水調(diào)零。
2、操作表
空白管 | 測定管 | |
樣本待測液(µl) | 108 |
蒸餾水(µl) | 108 | |||
試劑一(µl) | 6 | 6 | ||
混勻,25℃靜置 6min | ||||
試劑二(µl) | 6 | 6 | ||
混勻,25℃靜置 6min | ||||
試劑三(µl) | 80 | 80 | ||
混勻,25℃靜置 15 min,測定 510nm 處吸光值。ΔA=A 測定-A 空白,空白管只要做一 管。 |
類黃酮含量計算公式
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下標準曲線:y = 5.02x+0.0007,R2 = 0.9996
類黃酮含量(mg/g 干重)=(ΔA -0.0007)÷5.02÷(W÷V 樣總)= 0.398×(ΔA -0.0007)÷W V 樣總:加入提取液體積,2.5ml; V 樣:反應中樣品體積,0.108ml; W:樣品質(zhì)量,g b.用 96 孔板測定的計算公式如下
標準曲線:y = 2.51x+0.0007,R2 = 0.9996
類黃酮含量(mg/g 干重)=(ΔA -0.0007)÷2.51÷(W÷V 樣總)= 0.797×(ΔA -0.0007)÷W V 樣總:加入提取液體積,2ml;V 樣:反應中樣品體積,0.108ml;W:樣品質(zhì)量,g
*低檢出限為 10µg/g。
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