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Todd-Hewitt瓊脂培養(yǎng)基原理和使用方法
一、試驗(yàn)原理：
用于鏈球菌的分離培養(yǎng)。
細(xì)菌蛋白胨、牛心浸粉提供氮源、碳源、維生素和生長(zhǎng)因子；葡萄糖提供碳源；氯化鈉用于維持細(xì)胞滲透壓；碳酸鈉和磷酸氫二鈉提供無(wú)機(jī)鹽以及作為緩沖劑維持培養(yǎng)基的pH；瓊脂作為培養(yǎng)基的凝固劑。
二、培養(yǎng)基配方（g/L）：
細(xì)菌蛋白胨 | 20.0 |
牛心浸粉 | 3.1 |
碳酸鈉 | 2.5 |
葡萄糖 | 2.0 |
氯化鈉 | 2.0 |
磷酸氫二鈉 | 0.4 |
瓊脂 | 15.0 |
pH值7.8±0.2（25℃） | |
三、試驗(yàn)方法：
1. 稱取本品45.0 g，加熱溶解于1000 mL蒸餾水中，分裝，121℃高壓滅菌15分鐘，備用。
2. 制備質(zhì)控菌液；
3. 選擇合適稀釋度的質(zhì)控菌液100 μL，均勻涂布于待測(cè)培養(yǎng)基上，用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基，計(jì)算回收率；
4. 放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí)，記錄試驗(yàn)結(jié)果。
四、試驗(yàn)結(jié)果判斷：
接種以下質(zhì)控菌株，放置于36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí)。
質(zhì)控菌株 | 菌株編號(hào) | 接種量 （CFU） | 回收率 | 生長(zhǎng)情況 | 其他特征 |
溶血性鏈球菌 | CMCC(B) 32210 | 10-100 | ≥70% | +++ | 白色小菌落 |
糞鏈球菌 | ATCC 29212 | 10-100 | ≥70% | +++ | 白色小菌落 |
金黃色葡萄球菌 | ATCC 25923 | 10-100 | ≥70% | +++ | 乳白色大菌落 |
化膿性鏈球菌 | ATCC 19615 | 10-100 | ≥70% | +++ | 白色小菌落 |
圖1 Todd-Hewitt瓊脂培養(yǎng)基微生物質(zhì)控結(jié)果
注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。
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