百歐博偉生物：離子色譜在檢測陰陽離子方面成績顯著，因此許多實驗室都配有離子色譜儀。為了大家能更好地使用它，小編專門整理了這篇離子色譜使用、維護(hù)及保養(yǎng)手冊，希望幫助你在使用離子色譜儀的過程中有所助益。

首先什么是離子色譜？

離子色譜 (Ion Chromatography)是高效液相色譜(HPLC)的一種，是分析陰離子和陽離子的一種液相色譜方法。

狹義而言, 離子色譜法是以低交換容量的離子交換樹脂為固定相對離子性物質(zhì)進(jìn)行分離, 用電導(dǎo)檢測器連續(xù)檢測流出物電導(dǎo)變化的一種色譜方法。

《離子色譜原理與應(yīng)用》中對離子色譜法的定義是：利用被測物質(zhì)的離子性進(jìn)行分離和檢測的液相色譜法。

離子色譜儀的原理

分離的原理是基于離子交換樹脂上可離解的離子與流動相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子之間進(jìn)行的可逆交換和分析物溶質(zhì)對交換劑親和力的差別而被分離。適用于親水性陰、陽離子的分離。例如幾個陰離子的分離，樣品溶液進(jìn)樣之后，首先與分析柱的離子交換位置之間直接進(jìn)行離子交換（即被保留在柱上），如用NaOH作淋洗液分析樣品中的F-、Cl-和SO42-，保留在柱上的陰離子即被淋洗液中的OH-基置換并從柱上被洗脫。

對樹脂親和力弱的分析物離子先于對樹脂親和力強(qiáng)的分析物離子依次被洗脫，這就是離子色譜分離過程，淋出液經(jīng)過化學(xué)抑制器，將來自淋洗液的背景電導(dǎo)抑制到最小，這樣當(dāng)被分析物離開進(jìn)入電導(dǎo)池時就有較大的可準(zhǔn)確測量的電導(dǎo)信號。

開/關(guān)機(jī)操作

離子色譜儀分析過程由進(jìn)樣（樣品環(huán)進(jìn)樣）、分離（離子交換柱分離）、抑制（抑制器）、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)系統(tǒng)五部分組成。

基本操作步驟

1、開機(jī)前的準(zhǔn)備：打開實驗室空調(diào)，根據(jù)樣品的檢測條件和色譜柱的條件配置所需淋洗液和再生液。

2、開機(jī)：

a.依次打開打印機(jī)、計算機(jī)進(jìn)入操作系統(tǒng)；

b.打開氮?dú)怃撈靠傞y，調(diào)節(jié)鋼瓶減壓閥分壓表指針為0.2MPa左右，再調(diào)節(jié)色譜主機(jī)上的減壓表指針為5psi左右，確認(rèn)離子色譜儀與及計算機(jī)數(shù)據(jù)線連接正常，打開離子色譜主機(jī)電源；

c.點(diǎn)擊開始、程序、Chromeleon、sever monitor、雙擊桌面上工作站程序、雙擊安裝目錄下離子色譜操作控制面板；

d.操作控制面板打開后選中connected使軟件與離子色譜儀聯(lián)動起來，打開泵頭廢液閥排除泵和管路里的氣泡，關(guān)閉泵頭廢液閥，開泵啟動儀器，查看基線，待基線穩(wěn)定后方可進(jìn)樣分析。

3、樣品分析：建立程序文件；建立方法文件；建立樣品表文件；加樣品到自動進(jìn)樣器或手動進(jìn)樣；啟動樣品表；若是手動進(jìn)樣，按系統(tǒng)提示逐個進(jìn)樣分析。

4、數(shù)據(jù)處理：建立標(biāo)準(zhǔn)曲線；打印標(biāo)準(zhǔn)曲線；打印待測樣品分析報告。

5、關(guān)機(jī)：關(guān)閉泵，關(guān)閉操作軟件；關(guān)閉離子色譜主機(jī)電源；關(guān)閉氮?dú)怃撈靠傞y并將減壓表卸壓；關(guān)閉計算機(jī)、顯示器和打印機(jī)電源。

離子色譜儀維護(hù)注意事項

離子色譜儀維護(hù)主要就是幾大部件的維護(hù)，以下將按照流路順序為大家介紹下各部件的維護(hù)注意事項：

1、濾頭：

流動相起始部位，長期置于超純水中，保持濕潤狀態(tài)，但是水是容易變質(zhì)的，所以要經(jīng)常換水，以免生出藻類和菌類堵塞濾頭，造成系統(tǒng)壓力升高，或者會吸入泵頭內(nèi)造成單向閥的污染，引起壓力不穩(wěn)，流速不定。

2、恒流泵：

每天做完實驗對泵頭進(jìn)行清洗和后沖洗是很重要的，泵頭內(nèi)比較重要的部件就是單向閥，寶石桿，高壓密封圈，一般出問題的地方也是這幾個地方，使用堿性試劑很容易結(jié)晶，容易劃傷這些部位，所以要保證完整充分的清洗。如果長期不使用儀器，也要定期進(jìn)行清洗工作。

3、進(jìn)樣閥：

進(jìn)樣閥如果污染了會很容易造成堵塞和一些莫名其妙的問題，所以每次做完實驗是對進(jìn)樣閥進(jìn)行一些清洗工作，避免殘留和污染，清洗完后想辦法蓋上進(jìn)樣口，防止灰塵污染。

4、色譜柱：

色譜柱在淋洗液的環(huán)境中密封保存就可以了，盡量避免用水去沖洗，因為色譜柱在酸性或者堿性條件下更容易抑制細(xì)菌的生長，而且更接近于使用環(huán)境，如果純水保存很容易變質(zhì)，另外色譜柱最難承受有機(jī)物和重金屬的干擾，進(jìn)樣品盡量避免此兩種物質(zhì)進(jìn)入。如果長時間不使用色譜柱，也要定期使用淋洗液進(jìn)行清洗，防止內(nèi)部干燥和細(xì)菌生長。

5、抑制器：

抑制器最重要的是內(nèi)部要保持濕潤，所以如果長期不使用一定要定期進(jìn)行沖洗，沖洗完畢后將幾個與大氣相同的端口封閉保存。另外如果沒有液體經(jīng)過抑制器時，不能開電流，否則內(nèi)部的交換膜會被電解干裂，造成損壞。

6、電導(dǎo)檢測器：

也是定期沖洗，如果你一段時間不使用儀器，你可能會看到電導(dǎo)值居高不下，就是因為抑制器內(nèi)或者電導(dǎo)池內(nèi)的水變質(zhì)引起的，多沖洗一下就會降下來，但是也說明了維護(hù)不夠，是定期通水維護(hù)為好。

維護(hù)保養(yǎng)注意事項

1、試劑用水需要到達(dá)18.2M，洗脫液必須經(jīng)0.45um或更小的濾膜抽濾(必要時可用二層濾膜過濾)真空脫氣后才可使用。濾膜為一次性，每次使用前需要先過濾高純水以清洗干凈。抑制器再生液可以不過濾脫氣。

2、環(huán)境必須無腐蝕氣體，通風(fēng)良好。

3、樣品一定要去除固體微粒后才能進(jìn)樣。如樣品比較臟可以先用濾紙粗濾后再過0.45um的濾膜過濾，一定要得到澄清液后才經(jīng)濾頭進(jìn)樣。對有顏色的骯臟的樣品要用做前處理后才可進(jìn)樣。

4、洗脫液試劑需要優(yōu)級純以上。

5、分析柱不可摔打碰撞。

6、分析柱上有箭頭表示洗脫液流進(jìn)和流出的方向，不可以接反。

7、安裝分析柱時，為避免氣泡產(chǎn)生請按下述順序安裝：擰開分析柱進(jìn)口接頭螺絲，裝好配制的洗脫液，排氣泡后啟動IC泵，待有溶液從管接頭流出后，把分析柱進(jìn)口接頭螺絲擰緊，待有溶液從分析柱出口流出時，不要急于擰上出口接頭螺絲，讓溶液沖洗分析柱5分鐘左右，然后再接上分析柱出口接頭螺絲。

8、必須在有保護(hù)柱的情況下做樣。

9、不要把樣品中的氣泡注射入分析柱。

10、裝標(biāo)準(zhǔn)的容量瓶不可用酸泡。

11、高壓IC泵不可空轉(zhuǎn)。

12、每天關(guān)機(jī)前要用淋洗脫液沖洗分析柱30分鐘。

13、電腦中的電源管理和屏幕保護(hù)要關(guān)閉。

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