根據(jù)2020版《中國(guó)藥典》，細(xì)胞庫(kù)的建立可為生物制品的生產(chǎn)提供檢定合格、質(zhì)量相同、能持續(xù)穩(wěn)定傳代的細(xì)胞。

ICH Q5D中也有寫到：用連續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞生產(chǎn)生物技術(shù)產(chǎn)品及生物制品是每批產(chǎn)品都有一個(gè)經(jīng)檢定過(guò)的共同起源，即保存的細(xì)胞庫(kù)。

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中國(guó)藥典 3部 - 搜索 圖片

為確保生產(chǎn)的可持續(xù)性和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定，需提供檢定合格、質(zhì)量相同、持續(xù)穩(wěn)定的細(xì)胞，相應(yīng)的細(xì)胞庫(kù)應(yīng)當(dāng)被建立，從而保證每個(gè)產(chǎn)品都有一個(gè)經(jīng)過(guò)檢定的共同起始源的細(xì)胞。

細(xì)胞庫(kù)的建立

01三級(jí)細(xì)胞庫(kù)管理包括原始細(xì)胞庫(kù)（Primary Cell Bank, PCB）主細(xì)胞庫(kù)（Master Cell Bank, MCB）和工作細(xì)胞庫(kù)（Working Cell Bank, WCB）。

原始細(xì)胞庫(kù)(PCB)

PCB一般建立在實(shí)驗(yàn)室條件下，由RCB(Research Cell Bank)復(fù)蘇、擴(kuò)增得到。RCB的建立需經(jīng)歷載體的構(gòu)建、轉(zhuǎn)染、細(xì)胞群的篩選、單克隆細(xì)胞株的篩選等步驟。在用于后續(xù)建庫(kù)前，至少需要確保在其檢測(cè)中能做到無(wú)菌生長(zhǎng)和未檢測(cè)到支原體，同時(shí)展開(kāi)相應(yīng)的細(xì)胞穩(wěn)定性研究。

主細(xì)胞庫(kù)（MCB）

主細(xì)胞庫(kù)(Master Cell Bank，MCB)，原始細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞傳代增殖后均勻混合成一批，定量分裝，保存于液氮或-130℃以下。這些細(xì)胞須按其特定的質(zhì)控要求進(jìn)行全面檢定，全部合格后即為主細(xì)胞庫(kù)，供建立工作細(xì)胞庫(kù)用。主細(xì)胞庫(kù)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)高于初級(jí)細(xì)胞庫(kù)。生產(chǎn)企業(yè)的主細(xì)胞庫(kù)最多不得超過(guò)兩個(gè)細(xì)胞代次。

工作細(xì)胞庫(kù)（WCB）

工作細(xì)胞庫(kù)的細(xì)胞由MCB細(xì)胞傳代擴(kuò)增制成。由MCB的細(xì)胞經(jīng)傳代增殖，達(dá)到一定代次水平的細(xì)胞，合并后制成一批均質(zhì)細(xì)胞懸液，定量分裝于一定數(shù)量的安瓿或適宜的細(xì)胞凍存管，保存于液氮或-130℃以下備用，即為工作細(xì)胞庫(kù)。生產(chǎn)企業(yè)的工作細(xì)胞庫(kù)必須限定為一個(gè)細(xì)胞代次。

細(xì)胞庫(kù)的管理

02

• 主細(xì)胞庫(kù)和工作細(xì)胞庫(kù)應(yīng)分別存放。每一個(gè)庫(kù)應(yīng)在生產(chǎn)設(shè)施內(nèi)至少2個(gè)不同的地點(diǎn)或區(qū)域存放。應(yīng)監(jiān)測(cè)并維護(hù)細(xì)胞庫(kù)凍存容器，以保證細(xì)胞庫(kù)貯存在一個(gè)高度穩(wěn)定的環(huán)境中。
  

• 非生產(chǎn)用細(xì)胞應(yīng)與生產(chǎn)用細(xì)胞嚴(yán)格分開(kāi)存放。
  

• 每種細(xì)胞庫(kù)均應(yīng)分別建立臺(tái)賬，詳細(xì)記錄放置位置、容器編號(hào)、分裝及凍存數(shù)量，取用記錄等。細(xì)胞庫(kù)中的每支細(xì)胞均應(yīng)具有細(xì)胞系/株名、代次、批號(hào)、編號(hào)、凍存日期，貯存容器的編號(hào)等信息。
  

• 為保證細(xì)胞凍存后仍具有良好的活力，凍存前的細(xì)胞活力應(yīng)不低于90% ，凍存后應(yīng)取一定量的可代表凍存全過(guò)程的凍存管復(fù)蘇細(xì)胞，復(fù)蘇后細(xì)胞的活力應(yīng)不低于80%。二倍體細(xì)胞凍存后，應(yīng)至少做一次復(fù)蘇培養(yǎng)并連續(xù)傳代至衰老期，檢查不同傳代水平的細(xì)胞生長(zhǎng)情況。細(xì)胞凍存后，可通過(guò)定期復(fù)蘇細(xì)胞及復(fù)蘇后細(xì)胞的活力數(shù)據(jù)驗(yàn)證細(xì)胞在凍存及貯存條件下的穩(wěn)定性。

細(xì)胞檢定項(xiàng)目要求

03

不同液氮罐的選擇

04

基點(diǎn)全自動(dòng)化液氮罐

基點(diǎn)生物Hatch生物樣本深低溫全自動(dòng)存儲(chǔ)系統(tǒng)采用基點(diǎn)的深低溫自動(dòng)化技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了氣相液氮環(huán)境下凍存盒的快速智能存取，可顯著提升樣本的保存質(zhì)量、存取效率和安全性，讓樣本庫(kù)的智能化成為現(xiàn)實(shí)。

可以為組織、細(xì)胞、RNA、體液等生物樣本的長(zhǎng)期保存提供-180°C的深低溫環(huán)境，并可在罐內(nèi)-150℃環(huán)境下完成單管或整盒樣本的自動(dòng)化存取操作，樣本存取更智慧，挑管環(huán)境更安全，應(yīng)用技術(shù)更。

CBS隔氮型液氮罐

來(lái)自CBS的隔氮型干式儲(chǔ)存液氮罐，隔氮技術(shù)使液氮儲(chǔ)存安全、可靠、靈活，將液氮深低溫儲(chǔ)存性能提升到一個(gè)全新的高度，最大限度地保障樣品完整性。

1, 更安全的樣本存儲(chǔ)

儲(chǔ)存區(qū)域干燥，運(yùn)行非常安全，操作人員不會(huì)接觸液氮。

傳統(tǒng)液氮罐口結(jié)霜以后，霜掉到罐底，影響了液位傳感器的探測(cè)，忽高忽低，自動(dòng)加液裝置要么過(guò)充液氮，導(dǎo)致樣本浸在液氮里，要么快沒(méi)液氮也沒(méi)開(kāi)始充液氮。而CBS隔氮型液氮罐液位探頭在隔氮層，規(guī)避了如上風(fēng)險(xiǎn)。

2，溫度均一性更好：

液氮包覆層和氣口，通過(guò)內(nèi)表面?zhèn)鲗?dǎo)和氣口送氣冷卻樣品。CBS液氮罐-隔氮型設(shè)有干燥的深低溫儲(chǔ)存區(qū)域，其內(nèi)部平均溫度為-193°C。而市面上很多液氮罐只能達(dá)到-130~-150℃。

3，CBS 小型液氮罐1500AB，2ml凍存管可存儲(chǔ)9100支，50ml凍存袋可存儲(chǔ)434袋，滿足諸多客戶對(duì)于低存儲(chǔ)量的需求

基點(diǎn)高效氣相罐

基點(diǎn)氣相存儲(chǔ)系統(tǒng)，存儲(chǔ)間盡顯從容。

1，免液氮自動(dòng)化除霧

無(wú)需外接液氮輔助，罐口霧氣隨時(shí)隨地一鍵自動(dòng)清除。

2，控制系統(tǒng)

12英寸彩色觸摸屏控制系統(tǒng)，實(shí)時(shí)顯示溫度，液位，每天液氮消耗量及報(bào)警信息。

3，滿足您對(duì)性價(jià)比的追求

相關(guān)產(chǎn)品推薦

04

凍存和轉(zhuǎn)移

CBS 2101程序降溫儀基于 Windows Professional 操作系統(tǒng)的筆記本電腦控制器，降溫速率為每分鐘 0.01°C 至 99.9°C，設(shè)有六個(gè)易于運(yùn)行的預(yù)設(shè)降溫程序。程序性降溫主要是通過(guò)微處理器控制系統(tǒng)和電磁閥，控制噴入腔體中的液氮量來(lái)精確控制降溫速率。

CBS IntelliRate i67C可通過(guò)一次運(yùn)行數(shù)千個(gè)樣本來(lái)確保流程一致性，提高批次凍存通量，降低凍存成本。

• 更大的存儲(chǔ)空間，67L腔室體積

• 強(qiáng)大的程序設(shè)計(jì)和控制能力

• 多種凍存架類型，滿足不同樣品的凍存需求

2ml凍存管2166個(gè)

50ml凍存袋104個(gè)

250ml凍存袋52個(gè)

500ml/750ml/1000ml凍存袋26個(gè)

2ml AT瓶1521個(gè)

10ml AT瓶864個(gè)

麥管272根

CryoPod便攜式低溫運(yùn)送箱設(shè)計(jì)緊湊，輕型、便攜式液氮?dú)庀啻鎯?chǔ)環(huán)境，可持續(xù)控溫。

<-150℃低溫長(zhǎng)達(dá)4個(gè)小時(shí)，可顯示溫度，日期和時(shí)間，并具有聲音和視覺(jué)警報(bào)以及記錄功能，適合于園區(qū)與園區(qū)，上下樓層，從程控到液氮罐，或者從液氮罐到細(xì)胞房等短距離的冷凍樣本運(yùn)輸 。

細(xì)胞庫(kù)檢定

Ascend 是Revvity在第一代 Cellometer 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的基礎(chǔ)上進(jìn)行了升級(jí)。全新設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)板，靈活可變的多樣本檢測(cè)，兩種模式自動(dòng)聚焦、<30s速度快速檢測(cè)、超大面積圖像采集可覆蓋面積約為血球計(jì)數(shù)板的4-17倍等新性能，使細(xì)胞計(jì)數(shù)更準(zhǔn)確、可靠和高效。

ELx808 光吸收酶標(biāo)儀作為L(zhǎng)onza內(nèi)毒素定量檢測(cè)系統(tǒng)的一部分，經(jīng)過(guò)了充分的驗(yàn)證，專用于Kinetic-QCL™動(dòng)態(tài)顯色法、PYROGENT™-5000動(dòng)態(tài)濁度法LAL試劑盒，可以與WinKQCL™軟件無(wú)縫對(duì)接，進(jìn)行樣品檢測(cè)和數(shù)據(jù)分析，可用于QC放行檢測(cè)。

PyroWave 熒光酶標(biāo)儀用于重組C因子內(nèi)毒素檢測(cè)，與PyroGenrFC終點(diǎn)熒光試劑盒搭配，與WinKQCL™軟件無(wú)縫結(jié)合，采用380/440nm的激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)進(jìn)行內(nèi)毒素定量檢測(cè)。

MycoAlert支原體檢測(cè)試劑盒除細(xì)胞培養(yǎng)上清外，還可以檢測(cè)血清，未使用過(guò)的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基補(bǔ)充物等。此外其操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)迅速、通用性高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，已幫助很多實(shí)驗(yàn)室建立了細(xì)胞株監(jiān)測(cè)體系以預(yù)防支原體污染。