重組人BMP2的制備方法通常包括以下步驟

來源：賽爾瑞成（北京）生命科學(xué)技術(shù)有限公司 2025年03月12日 14:37

　　重組人BMP2的制備方法通常包括以下步驟：

　　1.基因工程手段：首先，將編碼BMP-2的基因插入到表達(dá)載體中，然后將其轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞，如大腸桿菌，使宿主細(xì)胞能夠表達(dá)BMP-2。

　　2.蛋白表達(dá)：在適宜的培養(yǎng)條件下，使轉(zhuǎn)入基因的細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵，大規(guī)模生產(chǎn)BMP-2蛋白。

　　3.細(xì)胞破碎與包涵體提?。和ㄟ^高壓勻漿等方法破壞細(xì)胞壁，收集并漂洗包含BMP-2的包涵體。

　　4.變性與復(fù)性：使用尿素等變性劑使蛋白復(fù)性，通過控制pH值和尿素濃度，以及應(yīng)用超濾膜技術(shù)，使變性的BMP-2蛋白重新折疊恢復(fù)活性。

　　5.純化：采用離子交換層析、親和層析等方法，去除雜質(zhì)，獲得高純度的rhBMP-2。

　　6.冷凍干燥：最后將純化后的蛋白進(jìn)行冷凍干燥，制成最終的成品。

　　重組人BMP2的存放要求對(duì)于保持其活性和穩(wěn)定性至關(guān)重要。以下是具體存放要求：

　　一、溫度控制

　　冷凍保存：應(yīng)存放在冷凍環(huán)境中，一般推薦的溫度為-20℃至-80℃。這樣的低溫環(huán)境可以有效地減緩蛋白質(zhì)的降解速率，保持其活性。

　　避免反復(fù)凍融：為了保持BMP-2的活性，應(yīng)避免對(duì)其進(jìn)行反復(fù)凍融。反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，從而影響其生物活性。

　　二、容器與包裝

　　無菌容器：BMP-2應(yīng)存放在無菌容器中，以避免細(xì)菌污染。無菌容器可以是玻璃瓶或塑料瓶，但必須經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌處理。

　　密封包裝：容器中的BMP-2應(yīng)密封包裝，以防止外界空氣和水分對(duì)其產(chǎn)生影響。

　　三、其他注意事項(xiàng)

　　避光保存：雖然直接光照對(duì)BMP-2的影響可能不是主要因素，但為了避免潛在的風(fēng)險(xiǎn)，建議將其存放在避光的地方。

　　遠(yuǎn)離有害物質(zhì)：BMP-2應(yīng)遠(yuǎn)離有害物質(zhì)，如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑等，這些物質(zhì)可能會(huì)與其發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性或失活。

　　標(biāo)注與記錄：在存放BMP-2的容器上應(yīng)清晰標(biāo)注其名稱、濃度、生產(chǎn)日期、有效期等信息，以便于管理和使用。同時(shí)，應(yīng)建立相應(yīng)的庫存記錄，跟蹤其使用情況。

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