來(lái)源：Quanterix生物技術(shù)

通過(guò)超靈敏免疫測(cè)定法測(cè)定血漿中蘇氨酸217磷酸化tau（p-tau217）已被證明是阿爾茨海默病（AD）的最佳生物標(biāo)志物。本研究旨在確定中國(guó)人血漿p-tau217的參考區(qū)間，并評(píng)估其對(duì)AD的診斷價(jià)值。我們招募了150名認(rèn)知功能未受損（CU）的個(gè)體、60名AD癡呆患者、30名AD導(dǎo)致的輕度認(rèn)知功能障礙（MCI）患者、40名額葉變性（FTLD）患者和70名皮層下缺血性血管性癡呆（SIVD）患者。使用單分子陣列測(cè)量血漿中p-tau217、總tau、淀粉樣β（Aβ）42和Aβ40的濃度。血漿p-tau217在鑒別AD患者與CU對(duì)照組、FTLD患者和SIVD患者（AUC = 0.983、0.936、0.892）以及鑒別MCI患者與CU對(duì)照組（AUC = 0.943）方面優(yōu)于其他生物標(biāo)記物。血漿p-tau217水平與有癥狀的AD患者的記憶力呈負(fù)相關(guān)。在中國(guó)人群中，血漿p-tau217對(duì)AD的診斷準(zhǔn)確性非常高，即使是在早期階段。

期刊：The Journal of Prevention of Alzheimer's Disease

2025年2月

研究機(jī)構(gòu)：天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院，天津金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室

研究背景

阿爾茨海默?。ˋD）的發(fā)病率不斷上升，預(yù)計(jì)到2050年將有超過(guò)1億人罹患該病，這已成為一項(xiàng)重大的全球性挑戰(zhàn)，并對(duì)社會(huì)和醫(yī)療機(jī)構(gòu)構(gòu)成嚴(yán)重威脅?；谘旱纳飿?biāo)志物在篩查、早期診斷、跟蹤進(jìn)展以及最終監(jiān)測(cè)AD治療效果方面具有很大的潛力。與其他血漿生物標(biāo)記物相比，血漿p-tau蛋白（通常采用超靈敏免疫測(cè)定法，如單分子陣列（Simoa®）進(jìn)行測(cè)量）在鑒別由CSF或PET生物標(biāo)記物或尸檢結(jié)果支持診斷的AD患者方面表現(xiàn)最佳。在各種p-tau蛋白中，蘇氨酸217處磷酸化的tau（p-tau217）在區(qū)分注意力缺失癥患者和其他神經(jīng)退行性疾病患者以及在輕度認(rèn)知障礙（MCI）階段檢測(cè)注意力缺失癥病理方面具有最大的潛力，p-tau217在AD的臨床前期和有癥狀階段都會(huì)隨著時(shí)間的推移出現(xiàn)顯著的淀粉樣蛋白依賴性變化，并且與AD臨床前期的臨床惡化和腦相關(guān)。

Simoa®方法具有靈敏度和精確度，可準(zhǔn)確定量血漿中的痕量生物標(biāo)志物。然而，Simoa®方法測(cè)定的血漿p-tau217的診斷價(jià)值和臨界值尚未在中國(guó)人群中得到驗(yàn)證。因此，本研究的目的是：1）在年齡跨度較大的中國(guó)人群中建立血漿生物標(biāo)志物（尤其是p-tau217）的參考區(qū)間（RIs）；2）確定血漿p-tau217和其他生物標(biāo)志物（包括Aβ40、Aβ42和t-tau）在從MCI到癡呆的AD連續(xù)體中的診斷性能，以及它們?cè)趨^(qū)分AD和其他常見(jiàn)類(lèi)型癡呆中的價(jià)值；以及3）分析AD連續(xù)體患者血漿生物標(biāo)志物和認(rèn)知功能之間的相關(guān)性。

實(shí)驗(yàn)方法

研究人群

所有患者均來(lái)自天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院記憶門(mén)診，由癡呆癥專(zhuān)家根據(jù)特定診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷，包括60名AD癡呆患者、30名MCI患者、40名額顳葉變性(FTLD)患者和70名皮質(zhì)下缺血性血管性癡呆(SIVD)患者；所有患者年齡為42–84歲。由另外兩個(gè)中心招募了150名認(rèn)知無(wú)障礙(CU)健康個(gè)體，這些個(gè)體沒(méi)有主觀認(rèn)知下降的癥狀，神經(jīng)系統(tǒng)或神經(jīng)心理學(xué)檢查結(jié)果正常。

生物標(biāo)志物分析

血液使用EDTA管收集，并在抽取后2小時(shí)內(nèi)離心（2500 rpm×15 分鐘，4°C）。然后將血漿分裝到聚丙烯管中，并在?80 °C下儲(chǔ)存直至分析。所有樣品在測(cè)試前再次離心（12,000 rpm×5分鐘，4°C），利用Quanterix的Simoa®酶聯(lián)免疫測(cè)定HD-X平臺(tái)對(duì)生物標(biāo)志物濃度進(jìn)行定量。使用ALZpath Simoa p-tau217 v2試劑盒（Quanterix,104371）檢測(cè)血漿p-tau217。使用Neurology 3-Plex Assay A Kit (Quanterix,101995)測(cè)量血漿Aβ42、Aβ40和t-tau水平。

統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 26.0、GraphPad Prism 8.0版軟件和R統(tǒng)計(jì)軟件4.3.0版進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用受試者工作特征（ROC）曲線檢驗(yàn)血漿生物標(biāo)志物在AD患者與CU之間以及AD患者與其他類(lèi)型癡呆患者之間的判別性能。計(jì)算AUC、截點(diǎn)以及相關(guān)的敏感度和特異度。

研究結(jié)果

1. 參考區(qū)間建立

共分析了240個(gè)樣本，樣本來(lái)自CU（n = 150）、MCI患者（n = 30）和AD患者（n = 60），以確定血漿生物標(biāo)志物的RI。本研究中的RI為血漿p-tau217 0.006-0.47 pg/mL（圖1），t-tau為 1.320-5.678pg/mL，Aβ42為3.91-12.0 pg/mL，Aβ40為106-284 pg/mL，Aβ42/40比率為0.025-0.057。

圖1 血漿p-tau217參考區(qū)間

2.組間血漿生物標(biāo)志物水平差異

各組血漿p-tau217水平存在顯著差異（圖 2）。AD組和MCI組的血漿p-tau217水平顯著高于CU對(duì)照組和其他兩組患者（所有p < 0.001），并且AD組高于MCI組（p < 0.001）。AD組和MCI組的Aβ42/Aβ40比值顯著低于CU對(duì)照組（vs.AD，p<0.001；vs.MCI，p<0.001）和FTLD組（vs.AD，p<0.001；vs.MCI，p<0.001），AD組顯著低于SIVD組（p=0.005），SIVD組顯著低于FTLD組（p=0.002）和CU組（p=0.002）。血漿t-tau水平，各組間無(wú)明顯差異（p=0.862）。

圖2 血漿生物標(biāo)志物

3.血漿生物標(biāo)志物的診斷和鑒別性能

生成了每種生物標(biāo)志物與診斷狀態(tài)相關(guān)的ROC曲線（圖 3），結(jié)果顯示血漿p-tau217在區(qū)分AD患者與CU（AUC = 0.983，95% CI 0.941–0.998，p < 0.001）、FTLD患者（AUC = 0.936，95% CI 0.869–0.975，p < 0.001）和SIVD患者（AUC = 0.892，95% CI 0.825–0.939，p < 0.001）方面具有最佳的診斷分類(lèi)性能。血漿Aβ42濃度和Aβ42/Aβ40比率在區(qū)分AD患者與CU（AUC = 0.715，95 % CI 0.625–0.793，p < 0.001；AUC = 0.760，95 % CI 0.674–0.833，p < 0.001）和FTLD患者（AUC = 0.842，95 % CI 0.756–0.907，p < 0.001；AUC = 0.780，95 % CI 0.686–0.857，p < 0.001）方面表現(xiàn)良好，但與SIVD患者（AUC = 0.578；AUC = 0.644）的表現(xiàn)不佳。血漿p-tau217在識(shí)別AD所致MCI患者方面的準(zhǔn)確性也高于血漿Aβ42/Aβ40比率（AUC = 0.764, 95 % CI 0.662–0.847, p < 0.001）。然而，血漿t-tau和Aβ40 的診斷準(zhǔn)確性較差，其AUC均小于0.70。

圖3 AD和MCI患者血漿生物標(biāo)志物的診斷和鑒別準(zhǔn)確性

4.血漿生物標(biāo)志物在AD連續(xù)體中的認(rèn)知相關(guān)性

各組間所有五個(gè)認(rèn)知領(lǐng)域的MMSE評(píng)分和z評(píng)分均存在顯著差異。在AD和MCI患者中，血漿p-tau217水平與記憶（r = ?0.291，p = 0.007）、信息處理（r = ?0.234，p = 0.033）和視覺(jué)空間功能（r = ?0.259，p = 0.017）呈負(fù)相關(guān)（圖4B、C、F）。然而，在調(diào)整年齡、性別和教育程度后，只有與記憶領(lǐng)域的相關(guān)性仍然顯著（r = ?0.218，p = 0.047）。認(rèn)知功能與血漿Aβ生物標(biāo)志物或t-tau之間沒(méi)有顯著相關(guān)性。

圖4 阿爾茨海默癥患者血漿p-tau217濃度與認(rèn)知功能的相關(guān)性

結(jié)果與討論

本研究在中國(guó)人群中建立了用Simoa®測(cè)量的血漿生物標(biāo)志物，特別是p-tau217的參考區(qū)間。與CU相比，AD引起的MCI患者的血漿p-tau217顯著升高，而AD癡呆患者p-tau217進(jìn)一步升高。血漿p-tau217對(duì)AD的診斷和鑒別準(zhǔn)確率明顯高于其他血漿生物標(biāo)志物。在AD連續(xù)體患者中，血漿p-tau217水平與認(rèn)知功能（尤其是在記憶領(lǐng)域）存在相關(guān)性。結(jié)果表明，血漿p-tau217是一種反映AD淀粉樣蛋白和tau病理的生物標(biāo)志物，可應(yīng)用于廣泛的臨床實(shí)踐，包括AD患者的識(shí)別和區(qū)分。本研究確定了中國(guó)人群血漿p-tau217 的診斷和鑒別值，包括年齡范圍廣泛的CU個(gè)體、從MCI到癡呆的AD連續(xù)體患者，以及患有其他類(lèi)型癡呆癥（如FTLD和SIVD）的患者。在本研究中，我們證明了用Simoa®測(cè)量的血漿p-tau217對(duì)中國(guó)隊(duì)列中的AD具有出色的診斷性能。血液中p-tau217的檢測(cè)有望成為臨床實(shí)踐中的寶貴補(bǔ)充，作為懷疑或排除AD病理的快速篩查測(cè)試以及指導(dǎo)和評(píng)估DMT的使用。