一、細(xì)菌的分布

微生物種類繁多，繁殖迅速，分布廣泛，不論自然界的空氣、土壤、水，生活中的食物、各種物體和器械表面，以及動(dòng)物和人的皮膚粘膜、與外界相通的腔道中都廣泛存在著數(shù)量極其龐大的各種微生物 ，其中以細(xì)菌、放線菌最多。因此，了解微生物在自然界及正常人體的分布，對(duì)于在醫(yī)療實(shí)踐及某些科學(xué)實(shí)驗(yàn)中樹(shù)立無(wú)菌觀念有著重要的意義。

（一）空氣中細(xì)菌的檢查（設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)選題）

（二）水中細(xì)菌的檢查（設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)選題）

（三）人體皮膚表面細(xì)菌的檢查（設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)選題）

【附錄】細(xì)菌菌落的計(jì)數(shù)方法

①選擇生長(zhǎng)均勻，無(wú)片狀菌苔生長(zhǎng)的平皿觀察。一般先用肉眼觀察，用記號(hào)筆在平板底上進(jìn)行點(diǎn)數(shù)（以免遺漏），然后再持放大鏡檢查有無(wú)遺漏的微小菌落。

②如菌落多而密集，可用分區(qū)法或菌落計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)。分區(qū)法是用記號(hào)筆在平皿底部通過(guò)圓心做垂直線，分為四區(qū)，再分別選擇菌落密集和稀疏的兩個(gè)區(qū)，再做平分線，使每一小區(qū)為平皿面積的1／8 或1／16，然后再分別挑選菌落稀疏和密集的兩小區(qū) 進(jìn)行計(jì)數(shù)，所得數(shù)乘以8或16，即為該平皿的菌落總數(shù)。

③簡(jiǎn)易的菌落計(jì)數(shù)器是一塊玻璃板上刻劃有144 個(gè)面積為1平方厘米的正方形小格。將長(zhǎng)有菌落的培養(yǎng)皿放上，計(jì)算10個(gè)小方格內(nèi)的菌落數(shù)，如為30個(gè)，則平均1小方格為3個(gè)菌落。若培養(yǎng)皿直徑是9厘米，則半徑為4.5厘米，整個(gè)培養(yǎng)皿上的菌數(shù)是3個(gè)×3.1416×（4.5） 2 =191個(gè)菌落。

二、外界因素對(duì)細(xì)菌的影響

微生物和外界環(huán)境有密切的關(guān)系，當(dāng)外界環(huán)境適宜就能進(jìn)行正常的新陳代謝生長(zhǎng)繁殖；當(dāng)外界環(huán)境條件發(fā)生巨大改變，可導(dǎo)致微生物的主要代謝活動(dòng)發(fā)生障礙，生長(zhǎng)停頓，甚至死亡。在醫(yī)學(xué)上常用人工的方法造成對(duì)微生物不利的環(huán)境，來(lái)抑制或殺滅微生物，以達(dá)到消毒滅菌的目的。其方法大致可分為物理、化學(xué)和生物三大類。

（一）物理因素對(duì)細(xì)菌的影響

1、溫度對(duì)細(xì)菌的影響

2、紫外線殺菌試驗(yàn)

（二）化學(xué)因素對(duì)細(xì)菌的影響

化學(xué)消毒劑的殺菌作用

（三）生物因素對(duì)細(xì)菌的影響

噬菌體的特異性裂解細(xì)菌試驗(yàn)

大腸桿菌、痢疾桿菌的肉湯培養(yǎng)物、痢疾桿菌噬菌體、普通肉湯、普通瓊脂平板。

【方法】

（1）將瓊脂平板劃分成三等份，注明1、2、3。

（2）分別以接種環(huán)取菌后，在1、3處涂布痢疾桿菌，2處涂布大腸桿菌。

（3）分別沾取一接種環(huán)的痢疾桿菌噬菌體加于1、2處，（注意不要交叉污染），另取一接種環(huán)的肉湯放于3處。

（4）置37℃孵育24小時(shí)后取出，觀察噬菌斑出現(xiàn)的位置，并記錄之。

（四）細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性試驗(yàn)---紙片擴(kuò)散法

又稱Bauer-Kirby法。是將干燥的浸有一定濃度抗菌藥物的濾紙片放在已接種一定量某種細(xì)菌的瓊脂平板上，經(jīng)培養(yǎng)后，可在紙片周圍出現(xiàn)無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)區(qū)，稱抑菌圈。測(cè)量抑菌圈的大小，即可判定該細(xì)菌對(duì)某種藥物的敏感程度。體外藥敏結(jié)果可作為病人治療選用藥物的參考。

【材料】

金黃色葡萄球菌、痢疾桿菌18～24小時(shí)培養(yǎng)物、普通瓊脂平板、小鑷子；含有青霉素、慶大霉素、紅霉素、復(fù)合磺胺、鏈霉素等抗生素的干燥濾紙片。

【方法】

（1）將金黃色葡萄球菌、痢疾桿菌培養(yǎng)物密集均勻地涂布整個(gè)平板。

（2）將含有抗生素藥物的濾紙片用燒灼滅菌的鑷子分別貼于平板表面，相互間應(yīng)間隔一定距離。

（3）37℃培養(yǎng)24小時(shí)后，觀察結(jié)果。

【結(jié)果】

根據(jù)藥物紙片周圍抑菌圈直徑的大小來(lái)判斷該菌對(duì)各種藥物的敏感程度。

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