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在生物醫(yī)藥和基因工程領域，質粒作為重要的工具載體，扮演著不可替代的角色。從基因克隆到表達載體構建，再到基因治療和疫苗開發(fā)，質粒的準確性和穩(wěn)定性直接決定了實驗結果的成功與否。為了確保這些關鍵環(huán)節(jié) ，質粒測序的重要性不言而喻。
質粒測序技術大比拼
當前主流的質粒測序技術各有千秋，不同的質粒測序方法各有優(yōu)缺點，適用于不同的實驗需求和場景。
質粒測序（一代測序）是指對多克隆位點及插入片段這個區(qū)域進行測序，而默認質粒的骨架區(qū)都是符合預期的序列。
全質粒測序是指對質粒全部序列進行測序，覆蓋質粒骨架（如復制起點、抗性基因、多克隆位點）和插入片段，確保質粒構建的準確性與完整性，及實驗數(shù)據(jù)的嚴謹和完整。基于測序平臺的不同，主要有二代高通量測序和三代單分子測序，兩者在技術原理、應用場景及成本效率上存在顯著差異。
不同測序技術如何選擇
選擇合適的質粒全測序解決方案需要根據(jù)具體需求（精度vs.結構解析）和實驗條件（預算、設備）來決定，根據(jù)測序目的、預算和樣本特性選擇合適的技術平臺，必要時可結合兩者（如用三代測序組裝骨架，二代測序校正突變）。隨著技術成本下降和便攜化發(fā)展，實時、長讀長測序將成為質粒分析的主流選擇。
常規(guī)驗證： 一代或二代測序。
復雜質粒：必須使用三代測序。
科研深度分析：聯(lián)用二代和三代提升準確性。
質粒全測序產品解決方案
Hieff NGS® PreMix Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina® (for1 ng)（Cat#17214)
建庫流程：質粒-轉座酶片段化-文庫擴增-純化（約1.2 h）
產品特色：
組分精簡，擴增酶和index預混，減少手工操作時間；
板式包裝，兼容手工建庫和自動化；
嚴格的批次性能與穩(wěn)定性質控。
Hieff® DNA Library Prep Kit for ONT（Cat#13301)
建庫流程：質粒-線性化-末修加A-barcode連接-純化-接頭連接-純化（約2 h）
產品特色：
操作簡便：末端修復、加A尾一步完成，產物無需純化，可直接進行Barcode接頭連接
兼容廣泛：可兼容動物、植物、微生物等多種樣本；兼容gDNA和擴增子樣本
數(shù)據(jù)表現(xiàn)優(yōu)異：文庫產出高、測序數(shù)據(jù)質量好
翌圣生物匠心研發(fā)多款適配質粒測序的產品滿足眾多客戶的不同需求，助力科學研究、臨床檢測更精準、更快捷！
質粒測序文庫構建產品選擇指南
類型 | 貨號 | 產品名稱 | 備注 |
質粒提取 | 18542ES | MolPure® Magnetic Endo-free Plasmid Mini Kit 磁珠法去內毒素質粒小量提取試劑盒 | 1-5 mL菌液提取 |
18543ES | MolPure® Magnetic Endo-free Plasmid med Kit 磁珠法質粒去內毒素中量提取試劑盒 | 5~20 mL細菌培養(yǎng)液中提取高達90 µg的去內毒素質粒DNA | |
二代文庫構建 | 17214ES | Hieff NGS® PreMix Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina® (for1 ng) | 轉座酶法建庫 |
線性化 | 15003ES | BamH I | EcoR I、BamHI 、Xho I 等，這些酶可以在特定序列處切割DNA。Sma I或XbaI，如果需要在多克隆位點（MCS）外切割。 |
15033ES | Xba I | ||
15012ES | Hind III | ||
三代文庫構建 | 13301 ES | Hieff® DNA Library Prep Kit for ONT（Cat#13301) | ONT平臺DNA建庫，標簽連接法 |
配套產品 | 12601ES | Hieff NGS® DNA Selection Beads分選磁珠(替代AMPure XP Beads) | 磁珠 |
12643ES | dsDNA BR Assay Kit | 質粒定量 | |
12642ES | 1×dsDNA HS Assay Kit | 文庫定量 | |
12416ES | Hieff NGS® Tagment Index Kit for Illumina® | 接頭引物，Illumina平臺 |
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