你以為細(xì)胞在培養(yǎng)皿里只是"躺平"？錯(cuò)！它們可是妥妥的"美食家"。血清——來自血液的黃金液體，就是細(xì)胞的滿漢全席！

Section.01

血清: 細(xì)胞的“五星級(jí)外賣”

血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后，分離出的淡黃色透明液體。

血清核心作用有哪些?

首先，血清可謂細(xì)胞食堂！氨基酸、葡萄糖、維生素、脂質(zhì)、微量元素……營(yíng)養(yǎng)直接拉滿，細(xì)胞干飯不擺爛！

血清還是貼壁神器！纖維連接蛋白、層粘連蛋白等——貼壁細(xì)胞的“強(qiáng)力膠”，防止細(xì)胞“躺平變圓” (拒絕 996，但貼壁必須穩(wěn))。

當(dāng)然，血清還是實(shí)驗(yàn) Buff：病毒培養(yǎng)、雜交瘤存活、凍存保護(hù)……血清在手，科研不愁！

細(xì)胞的“米其林廚房”如何煉成?

血清生產(chǎn)流程：血液采集 → 凝固分離 → 三級(jí)過濾 → 質(zhì)檢分裝 → 冷鏈配送。

圖 1. 血清生產(chǎn)流程圖。

Section.02

質(zhì)檢內(nèi)-幕:

血清屆的“魔鬼面試”

你以為血清隨便就能上崗？它可是要過五關(guān)斬六將！涵蓋質(zhì)量監(jiān)控、微生物驗(yàn)證、生化檢測(cè)等諸多環(huán)節(jié)。當(dāng)然，實(shí)踐出真知！經(jīng)過客戶實(shí)踐驗(yàn)證的血清才是好血清~

血清的質(zhì)量檢測(cè)

血清的客戶驗(yàn)證

表 1. 文獻(xiàn)研究中的血清使用及培養(yǎng)參考。

實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 1：趨化實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株：THP -1 cells

培養(yǎng)基：RPMI 1640 +10% FBS +1% P/S

細(xì)胞密度：1.5×105 個(gè)/孔

培養(yǎng)時(shí)間：4 h

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：Mouse MCP-1 有促進(jìn) THP-1 細(xì)胞正向定向遷移，且呈現(xiàn)出濃度依賴性。

圖 2. 探究 Mouse MCP-1 對(duì) THP -1 趨化的影響。

實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 2：細(xì)胞生長(zhǎng)

實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株：SH-SY5Y cells

培養(yǎng)基：DMEM/F12 培養(yǎng)基 +15% FBS +1% P/S

細(xì)胞密度：4.5×103 個(gè)/孔

培養(yǎng)時(shí)間：48 h

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：Human Neurofascin 可以促進(jìn) SH-SY5Y 細(xì)胞突觸延伸。

圖 3. 探究 Human Neurofascin 對(duì) SH-SY5Y 細(xì)胞突觸的影響。

實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 3：劃痕實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株：AGS cells

培養(yǎng)基：Ham's F-12 + 10% FBS +1% P/S

細(xì)胞密度：2×106 個(gè)/孔

培養(yǎng)時(shí)間：24 h

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：Human GRIK 抑制 AGS 細(xì)胞的損傷后的“愈合”作用。

圖 4. 探究 Human GRIK2 對(duì) AGS 細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的影響。

實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 4：細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株：Balb/3T3 cells

培養(yǎng)基：DMEM +10% FBS

細(xì)胞密度：3×103 個(gè)/孔

培養(yǎng)時(shí)間：48 h

檢測(cè)試劑：CCK8

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：Human Amphiregulin 可以促進(jìn) Balb/3T3 細(xì)胞的增殖，ED50=14.39 ng/mL。

圖 5. 探究 Human Amphiregulin 對(duì) Balb/3T3 細(xì)胞增殖的影響。

實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 5：Transwell 遷移實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株：PC-3 cells

培養(yǎng)基：Ham's F-12 + 10% FBS +1% P/S

細(xì)胞密度：7×104 個(gè)/孔

培養(yǎng)時(shí)間：24 h

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：Human Androgen receptor 抑制 PC-3 細(xì)胞的遷移，隨著濃度增加，遷移呈現(xiàn)負(fù)趨勢(shì)。

圖 6. 探究 Androgen receptor 對(duì) PC-3 細(xì)胞遷移的影響。

MCE 血清在各細(xì)胞系中的驗(yàn)證

Section.03

靈魂拷問:

血清使用的終-極難題

1. 血清應(yīng)該如何保存？

經(jīng)常使用的血清分裝后保存在 -20℃ 即可，長(zhǎng)期保存建議保存在 -80℃。反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致血清有沉淀析出，建議將大規(guī)格血清分裝成單次使用規(guī)格后保存，按需取用。

低溫保存，拒絕反復(fù)凍融?。。?/span>

2. 血清應(yīng)該如何解凍？

解凍時(shí)需要從低溫中取出后，放置于 2-8℃ 冰箱中緩慢解凍，在溶解過程中避免劇烈震蕩，可隔一段時(shí)間，緩慢晃動(dòng)，混合溶解成分并加速溶解過程。不可將血清直接從低溫拿到室溫/25-37℃ 環(huán)境中溶解，巨大的溫度變化容易使血清產(chǎn)生絮狀沉淀，且長(zhǎng)時(shí)間放置在室溫/25-37℃ 環(huán)境中，容易使血清中活性物質(zhì)發(fā)生變化，影響細(xì)胞生長(zhǎng)等。

緩慢升溫，拒絕暴力搖晃?。?！

3. 血清溶解后的沉淀是什么？

血清中出現(xiàn)的沉淀物質(zhì)可能包括纖維蛋白 (絮狀沉淀)、脂蛋白、冷凝集素、玻連蛋白、胎球蛋白、磷酸鈣與草酸鈣 (顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀) 及膽固醇等。

4. 血清在使用之前需要再次過濾？

血清在生產(chǎn)過程中嚴(yán)格執(zhí)行三級(jí)過濾 (0.1 μm)，標(biāo)準(zhǔn)的無菌操作，不建議在使用前再次過濾，再次過濾可能會(huì)導(dǎo)致血清中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少。

5. 血清在使用前是否需要熱滅活？

熱滅活是指在 56℃，30 min 處理已經(jīng)完-全解凍的血清，熱滅菌可以使血清中的補(bǔ)體去活化。熱滅活血清對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)作用或者沒有作用，但通常會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)速度慢，血清中 沉淀物顯著增多等問題。非必要，不建議熱滅活。

6. 我要替換我現(xiàn)在使用的血清，應(yīng)該怎么操作呢？

細(xì)胞對(duì)于日常培養(yǎng)條件具有適應(yīng)性，貿(mào)然打破會(huì)導(dǎo)致它不適應(yīng)新的生活環(huán)境，需要先進(jìn)行馴化。建議復(fù)蘇細(xì)胞使用原品牌血清，傳代 1-2 代，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后，新血清：原血清=1:3 進(jìn)行第一次換液，新血清逐代提高至 50%，75%，100%，過程注意監(jiān)控細(xì)胞狀態(tài)，穩(wěn)定情況下傳代，且需要保持較高的傳代密度。

Tips：文末彩蛋~細(xì)胞培養(yǎng)的哲學(xué)

細(xì)胞如頂流明星，血清是獨(dú)-家營(yíng)養(yǎng)師——科研圈沒有“湊合”的容身之地，只有“硬核”的生存法則！

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小結(jié)

點(diǎn)擊關(guān)注，解鎖更多血清及細(xì)胞培養(yǎng)秘籍，讓你的細(xì)胞穩(wěn)坐 C 位，Paper 輕松登頂！

參考文獻(xiàn)：

[1] Yang J,et al. VSTM2L protects prostate cancer cells against ferroptosis via inhibiting VDAC1 oligomerization and maintaining mitochondria homeostasis. Nat Commun. 2025 Jan 29;16(1):1160.

[2] Han H, et al. Therapeutic potential of monomethyl fumarate and aluminum ion combination in alleviating inflammation and oxidative stress in psoriasis. Redox Biol. 2025 Feb;79:103482.