手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
| 一、Fluo-3AM的理化性質(zhì) 顏色及形狀：橘紅色液體 純度：，大于95%（液相） 溶解性：溶于DMSO 吸收波長(zhǎng)/發(fā)射波長(zhǎng)：506nm /526nm（低/高鈣） 消散系數(shù)：86000/Mcm（506nm） 保存與使用：粉狀的FLUO-3AM應(yīng)保存于-20度以上。建議使用DMSO作為溶媒。在溶解前，F(xiàn)LUO-3AM和DMSO均須放置至室溫。溶解過(guò)程可能會(huì)比較慢。用無(wú)水的DMSO溶解的FLUO-3AM長(zhǎng)期保存，應(yīng)嚴(yán)格密封，并保存于-20度。使用前，將保存液放置至室溫后再打開(kāi)。可避免AM探針在長(zhǎng)期的保存過(guò)程中水解。 二、Fluo-3AM的工作原理 FLUO-3廣泛用于長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光鈣指示劑。其在506NM處被吸收，可以被氬離子激光的488nm激發(fā)光激發(fā)，便于檢測(cè)。FLUO-3在沒(méi)有同鈣結(jié)合的情況下，無(wú)熒光產(chǎn)生。但是，在與鈣結(jié)合后，熒光（526nm）增強(qiáng)至少40倍。Fluo-3 AM是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。Fluo-3 AM的熒光非常弱，其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度升高而增強(qiáng)。Fluo-3 AM進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-3可以和鈣離子結(jié)合，結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光，zui大激發(fā)波長(zhǎng)為506nm，zui大發(fā)射波長(zhǎng)為526nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488nm左右，發(fā)射波長(zhǎng)為525-530nm。 三、Fluo-3AM的應(yīng)用 1、過(guò)程概述 用于細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(cè)時(shí)，F(xiàn)luo-3 AM的常用濃度為0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fluo-3 AM的適當(dāng)溶液和細(xì)胞一起在20-37℃孵育15-60分鐘進(jìn)行熒光探針裝載，隨后適當(dāng)洗滌，洗滌后可以考慮適當(dāng)再孵育20-30分鐘以確保Fluo-3 AM在細(xì)胞內(nèi)*轉(zhuǎn)變成Fluo-3。然后在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行檢測(cè)。 2、Fluo-3AM使用液的配置 100ug的Fluo-3AM，分子量是1219.9。按實(shí)際需要的摩爾濃度折算，無(wú)水DMSO溶解。一般配置成1~5mM的DMSO儲(chǔ)存液。如出現(xiàn)難溶現(xiàn)象，可以用20%的F127的DMSO溶液助溶。 四、注意事項(xiàng)： 1、熒光染料有淬滅問(wèn)題，應(yīng)盡量避光保存； 2、實(shí)驗(yàn)時(shí)注意個(gè)人防護(hù)，戴手套、口罩； 五、應(yīng)用舉例 （一）配置與貯存 1、基本信息 分子量：1129.9 包裝單位重量：0.1mg 貯存濃度：5000μM/L 使用終濃度：5μM/L 2、貯存液的配制（5000μM/L） 按照說(shuō)明書(shū)，計(jì)算0.1mg 的摩爾數(shù)為0.089μM ，則需加DMSO18uL，微量加樣器反復(fù)吹打混勻后分裝，按說(shuō)明書(shū)要求避光-20度冰凍保存。 （二）應(yīng)用 每毫升細(xì)胞懸液中加入1 uL，則Fluo-3AM的使用終濃度為5μM/L 訂購(gòu)信息：
|
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心