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人apelin 13（AP13）Elisa試劑盒技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)
使用目的：
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中apelin 13（AP13）含量。
人apelin 13（AP13）實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人apelin 13（AP13）水平。用純化的人apelin 13（AP13）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加apelin 13（AP13），再與HRP標(biāo)記的apelin 13（AP13）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的apelin 13（AP13）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人apelin 13（AP13）濃度。
試劑盒組成
| 1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品（8000 ng/L） | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
| 5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
| 6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個(gè) |
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人apelin 13（AP13）操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
| 4000 ng/L | 5號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 2000 ng/L | 4號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 1000 ng/L | 3號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 500 ng/L | 2號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 250 ng/L | 1號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人apelin 13（AP13）相關(guān)產(chǎn)品：
小鼠促甲狀腺素釋放激素（TRH）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素（CRH）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠胰島素受體β（ISR-β）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠糖化血紅蛋白A1c（GHbA1c）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3（LFA-3/CD58）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠骨成型蛋白7（BMP-7）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠透明質(zhì)酸（HA）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠25羥基維生素D3（25（OH）D3/25 HVD3）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠維生素C（VC）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠維生素B6（VB6）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠肌紅蛋白（MYO/MB）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠血栓素B2（TXB2）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠乙酰膽堿（ACH）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠組織多肽抗原（TPA）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠組織型纖溶酶原激活劑（t-PA）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠維生素D（VD）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠維生素K1（VK1）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠維生素B12（VB12）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠維生素D3（VD3）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
小鼠維生素D2（VD2）試劑盒免費(fèi)代測，96T/48T現(xiàn)貨
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