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極妙的選擇方法:我們來為抗體做一個(gè)對比

來源:上海滬鼎進(jìn)口生物試劑銷售網(wǎng)   2014年04月01日 10:54  

    我公司所供應(yīng)的抗體試劑質(zhì)量給您的保證,而且價(jià)格合理。許多朋友們在抗體的選擇上做一個(gè)很大的糾結(jié)呀,今天上海滬鼎來給朋友們推薦一個(gè)極妙的選擇方法:我們來為抗體做一個(gè)對比。 
免疫印跡和免疫沉淀
    對免疫印跡和免疫沉淀而言,可用方法本身來檢測反應(yīng)的特異性和相對強(qiáng)度,因?yàn)榻Y(jié)合的抗原已被SDS-PAGE分離,從而能可靠地顯示抗體識別抗原基團(tuán),并且很容易相互比較抗體。因此.在比較和選擇*抗體時(shí).免疫印跡和免疫沉淀是zui簡單的測試方法。

免疫親和純化
    對用于免疫親和純化的不同抗體來說,有幾個(gè)關(guān)鍵步驟可用于獲取有效來源的抗原??偟膩碇v,免疫親和純化依靠單抗,因?yàn)閱慰寺】贵w相互作用的單個(gè)位點(diǎn)在洗脫時(shí)比多克隆抗體更容易破壞,但是抗肽抗體的使用是一個(gè)例外。
    對不同來源免疫親和純化抗體的檢測,zui容易且*的*步方法是用免疫沉淀,這可用于模擬抗體結(jié)合在溶液中天然來源的抗原。在溶液中可有效結(jié)合絕大部分抗原,并且在免疫沉淀蛋白的SDS—PAGE中所顯示的背景區(qū)帶較低的抗體,可對其做進(jìn)一步的評價(jià),包括確定適當(dāng)?shù)南疵摋l件。
免疫染色
    用于培養(yǎng)細(xì)胞或組織染色的抗體選擇比較困難,如上所述,一般不采用免疫染色方法檢測抗原的特異性,相比而言,在免疫染色之前,可選用的抗體用于免疫沉淀和免疫印跡的染色。沒有背景區(qū)帶表明背景問題很小,隨后需要仔細(xì)設(shè)計(jì)抗原對照。
    商業(yè)抗體的比較  各公司出售的抗體并不是對所有的方法均適用。一些商業(yè)廠家經(jīng)常生產(chǎn)和銷售一些特征不明的抗體,對購買的試劑應(yīng)在各自實(shí)驗(yàn)室重新滴定。不能單憑公司的宣傳而隨意應(yīng)用所購買的抗體。在購買某一商業(yè)抗體之前應(yīng)核對說明書,如果抗體不像廣告宣傳的那樣,可以申訴,讓供應(yīng)商知道他們的產(chǎn)品不是所希望的,如是守信譽(yù)的供應(yīng)商應(yīng)幫助解決因抗體質(zhì)量造成的問題,并提供所要求的抗體或在某些方面做些補(bǔ)償。
    購買抗體時(shí)應(yīng)計(jì)算實(shí)驗(yàn)所需要的抗體用量,對于有些方法如免疫親和純化,不可能提供所需要的抗體量,因此需要尋找其他抗體來源。許多雜交瘤細(xì)胞株可以從美國或歐洲某些動物細(xì)胞培養(yǎng)中心購買獲得,通過實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng),制備大量實(shí)驗(yàn)所需的抗體。

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