手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
免疫印跡封閉液
在WB實驗過程中，我們常常會提到封閉液的使用問題。我們會使用到封閉液的原因是因為在電泳轉(zhuǎn)膜后，膜上其它沒有結(jié)合蛋白質(zhì)的空白位置需要用封閉液加以封閉，以避免非特異性結(jié)合。而Western Blotting的靈敏度，特異性在很大程度取決于封閉的好壞。過度的封閉導(dǎo)致抗原表位的遮蔽，從而降低檢測靈敏度。不*封閉又會導(dǎo)致zui終背景增高或信噪比太低。zui常用的封閉液是脫脂奶粉，由于脫脂奶粉的成分比較復(fù)雜，里面微量的生物素或堿性磷酸酶就可能造成背景的污染而不太適合生物素－親和素檢測和堿性磷酸酶底物檢測系統(tǒng)。另外，脫脂奶粉里的其它微量蛋白質(zhì)有可能和待檢測抗原有相似的抗體識別表位而造成交叉反應(yīng)。還有的實驗室也會用到BSA和CASEIN，這兩種蛋白的溶液的封閉效果總體來說要比脫脂奶粉要好些，但是由于每個實驗室人工配置溶液的不穩(wěn)定因素，zui后的實驗結(jié)果也存在了批間差異的問題。而KPL公司生產(chǎn)的Detector Block™就可以解決這個問題。下圖是幾種封閉液對比實驗
從圖中可以看出，脫脂奶粉封閉的效果是zui不好的，不僅靈敏度很低，而且背景比較高，BSA和Casein的封閉效果是差不多的，而，KPL公司的成品Detector Block™則背景比較低，而且靈敏度很高，這樣的封閉液對于對靈敏度需求比較高的客戶，以及實驗結(jié)果需要清晰圖片發(fā)文章的客戶來說，是個不錯的選擇，另外，對了試劑盒生產(chǎn)廠家，購買成品的封閉液，有利于產(chǎn)品的穩(wěn)定性的提高。
相關(guān)產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心