紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的用途主要?dú)w納為以下幾點(diǎn)
一、分光光度計(jì)的用途之一是鑒定物質(zhì)。用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱(chēng)為可見(jiàn)分光光度計(jì);紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器??梢詼y(cè)定核酸和蛋白的濃度,也可以測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。
二、分光光度計(jì)的用途之二待測(cè)物質(zhì)是標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照進(jìn)行分析。
三、分光光度計(jì)的用途之三是比較zui大吸收波長(zhǎng)吸收系數(shù)的一致性。
四、分光光度計(jì)的用途之四是物質(zhì)的純度檢驗(yàn)。
五、分光光度計(jì)的用途之五是推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)及構(gòu)成。
六、分光光度計(jì)的用途之六是判定絡(luò)合物的組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定。
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量, 相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其 *的、固定的吸收光譜曲線(xiàn),可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或 測(cè) 定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。紫外可見(jiàn)分光光度法的定量分析基礎(chǔ)是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。朗伯定律是說(shuō)明光的吸收與吸收層厚度成正比,比耳定律說(shuō)明光的吸收與溶液濃度成正比;如果同時(shí)考慮吸收層厚度和溶液濃度對(duì)光吸收率的影響,即朗伯-比耳定律。
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