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唾液酸分析指南,Ludger可提供唾液酸分析服務(wù)

來(lái)源:北京群曉科苑生物技術(shù)有限公司   2015年01月30日 09:26  

唾液酸分析指南如下,Ludger公司可以提供唾液酸分析的技術(shù)服務(wù)


NeuAc(唾液酸)和NeuGc(神經(jīng)氨酸)的定量分析是監(jiān)管機(jī)構(gòu)在生物制藥表征的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格指南中提出的一個(gè)要求。特別是,人類和非人類的唾液酸 (NeuAc / NANANeuGc / NGNA分別)相對(duì)水平測(cè)定是非常重要的,因?yàn)橛行┎∪擞懈咚降目股窠?jīng)氨酸(anti-NeuGc)抗體,這可導(dǎo)致中和反應(yīng)和快速清除含有神經(jīng)氨酸(NeuGc)的生物藥品 (Nguyen,2005)。


由于唾液酸(NeuAc)和神經(jīng)氨酸(NeuGc)在分析糖蛋白中具有重要意義,它通常被認(rèn)為是生物治療藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性(CQA)。


較廣泛的唾液酸(NeuAc)和神經(jīng)氨酸(NeuGc)比例確定方法是如下:

    1. 通過(guò)輕度酸水解放糖蛋白上的唾液酸殘基。

    2. 用1-1,2 - 二氨基-4,5 - 亞甲基苯酚(DMB)熒光標(biāo)記釋放的唾液酸。

    3. 通過(guò)液相色譜法(HPLC)或超液相色譜法(UHPLC)對(duì)DMB標(biāo)記的唾液酸進(jìn)行相對(duì)定量分析。


LudgerDMB標(biāo)記試劑盒(貨號(hào):LT-KDMB-A1),提供從糖蛋白釋放唾液酸并用DMB標(biāo)記的所有功能。該試劑盒包含可以檢測(cè)高達(dá)22個(gè)糖蛋白樣品(每樣品含50-100 μg糖蛋白)的試劑和材料。每個(gè)標(biāo)記可標(biāo)記每個(gè)樣品中大約10 pmol2.5 nmol的唾液酸。

    

試劑盒中包含一系列唾液酸的參考標(biāo)準(zhǔn)品(含Neuc,Neu5GcNeu5,7Ac2Neu5,Gc9AcNeu5,9Ac2,Neu 5,7,8),9Ac3Gc),以及NeuAcNeuGc的定量標(biāo)準(zhǔn)品。這三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品可以隨著釋放的唾液酸樣品進(jìn)行DMB標(biāo)記。


系列稀釋液制備后的NeuAcNeuGc定量標(biāo)準(zhǔn)品可用于定量分析。LudgerTag?DMB試劑盒中有提供關(guān)于如何制備的說(shuō)明. 如有需要NeuAcNeuGc定量標(biāo)準(zhǔn)品也可在另行購(gòu)買(mǎi),請(qǐng)跟我們。


作為陽(yáng)性對(duì)照,我們建議使用包含NeuAcNeuGc唾液酸的胎球糖蛋白,我們同樣建議使用zui純化的LudgerBioQuantTM糖肽標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)作為陽(yáng)性對(duì)照。這個(gè)糖肽標(biāo)準(zhǔn)品(貨號(hào): BQ-GPEP-A2G2S2-10U)是一個(gè)復(fù)雜的N-連接雙觸角聚糖,終止于兩個(gè)N-乙酰神經(jīng)氨酸。


使用此標(biāo)準(zhǔn)品可以檢查聚糖釋放、標(biāo)記和回收的有效性,并可增強(qiáng)您的唾液酸測(cè)量準(zhǔn)確性。Ludger還銷(xiāo)售可用于識(shí)別Neu5,9Ac2的標(biāo)準(zhǔn)品。水可以作陰性對(duì)照。


1:由LS-UR2 UHPLC色譜柱(貨號(hào)LS-UR2-2.1x100)分析出來(lái)的DMB-標(biāo)記唾液酸對(duì)照品。

為了檢測(cè)聚糖的分離該對(duì)照品也可以作為跑樣之前的系統(tǒng)適用性標(biāo)準(zhǔn)品。



唾液酸分析相關(guān)產(chǎn)品

商品型號(hào)

英文品名

中文品名

包裝

LT-KDMB-A1

DMB Sialic Acid Labeling Kit

DMB 唾液酸釋放標(biāo)記試劑盒

1Reaction Set

LS-R1-4.6x150

Ludger Sep R1 HPLC Column

R1 HPLC 色譜柱-唾液酸

4.6 x150 mm

LS-UR2-2.1x100

Ludger Sep UR2 UHPLC Column–sialic acids

UR2 UHPLC 色譜柱-唾液酸

2.1 x 100 mm

CM-NEU-AC-01

N-acetylneuraminic acid quantitative standard

N-乙酰神經(jīng)氨酸定量標(biāo)準(zhǔn)品

1 nmol

CM-NEU-GC-01

N-glycolyneuraminic acid quantitative standard

N-羥乙酰神經(jīng)氨酸定量標(biāo)準(zhǔn)品

1 nmol

CM-NEU5,9,AC-01

N-acetylneuraminic acid qualitative standard

N-乙酰神經(jīng)氨酸定性標(biāo)準(zhǔn)品

1 nmol

BQ-GPEP-A2G2S2

A2G2S2 glycopeptide standard

A2G2S2 糖肽標(biāo)準(zhǔn)品(用于唾液酸釋放和標(biāo)記過(guò)程)

10 μg

GCP-FET-50U-X4

Fetuin Glycoprotein (4 x 50 ug)

胎球糖蛋白(4×50微克)(唾液酸化陽(yáng)性對(duì)照)

4 x 50 μg


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