如何在免疫組化中處理弱陽性的問題？

來源：上海萬疆生物技術有限公司 2015年02月02日 09:57

如何在免疫組化中處理弱陽性的問題

如果陰性對照沒有染色而陽性對照標本弱陽性，除了考慮上述因素外，還應考慮：

① 標本的固定方式，不當?shù)墓潭ǚ绞交蚬潭〞r溫度過高，都會影響到所檢測的抗原的數(shù)量和質(zhì)量。

② 不適當?shù)目乖迯头绞?，由于石蠟切片在制作的過程中固定劑對抗原的封閉作用，必須用抗原熱修復或酶消化或兩種同時使用的抗原雙暴露法，至于使用哪一種方法，應參照生產(chǎn)廠家的說明，同時結(jié)合標本的具體情況而定。

③ 抗體的稀釋度是否過高或者孵育的溫度/時間是否正確。一般試劑生產(chǎn)廠家都會對試劑給出一定的使用范圍，但是由于使用者的標本來自各種組織，處理過程也不盡相同，所以應參照使用范圍，對所使用的一抗進行梯度測試，找出*的使用濃度。

④ 切片上了過多的沖洗液，當抗體加至切片上時，等于人為地對抗體進行了進一步的稀釋。

⑤ 孵育時切片是否放置水平，否則會導致抗體流失。

　如果陰性對照沒有反應，陽性對照反應良好，而標本弱陽性，則可能是由于陽性對照不是同一種組織、或固定方式不同等原因所致。

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