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兔阿霉素(ADR)Elisa試劑盒-恒斐生物

來(lái)源:上海恒斐生物技術(shù)有限公司   2015年07月21日 10:24  

兔阿霉素(ADR)Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)

操作步驟:1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照說(shuō)明書(shū)在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4.  配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5.  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.  加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.  溫育:操作同3。
8.  洗滌:操作同5。
9.  顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

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