很多用戶對于熒光分光光度計的原理不是很了解,為了讓大家對熒光分光光度計的原理有一個深刻的了解,上海旦鼎技術(shù)人員特意為您提供了以下資料。并為您區(qū)別熒光分光光度計與紫外分光光度計的不同之處。
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一、熒光分光光度計原理
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。
物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài),這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光。
不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。
在溶液中,當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時,其熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即IF=KC,利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似,熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行。
二、熒光分光光度計與紫外分光光度計的區(qū)別
兩種儀器的原理*不同。
1、熒光分光光度計由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過濾過和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。
2、紫外分光光度計是根據(jù)朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)光吸收的基本定律,即物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量。
通俗的說,熒光分光光度計是測樣品中物質(zhì)被激發(fā)出了光能量,紫外分光光度計是測樣品中物質(zhì)吸收了光能量,原理*不同。
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