小鼠血清、血漿及相關液體樣本中C肽（C-Peptide）含量的測定

    （本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!）

    聲明：尊敬的客戶，感謝您選用本公司的產品。本產品選用世界生產廠家的原料，采用專業(yè)ELISAkit生產技術制造。適用于體外定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿或細胞培養(yǎng)上清液中天然和重組C-Peptide濃度。使用前請仔細閱讀說明書并檢查試劑組分！如有疑問，請及時上海遠慕生物科技有限公司。

    1.小鼠C肽（C-Peptide）定量檢測試劑盒（ELISA）

    2.蒸餾水

    實驗設備

    1.37℃恒溫箱

    2.標準規(guī)格酶標儀

    3.精密移液器及一次性吸頭

    4.一次性試管

    5.吸水紙

    實驗步驟

    1.準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。

    2.配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

    3.加標準品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對照孔不加。

    4.溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

    5.洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。

    6.加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。

    7.溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

    8.洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。

    9.顯色：每孔先加入顯色劑A液50μL，再加入顯色劑B液50μL，平板混勻器混勻30s（或用手輕輕震蕩混勻30s），37℃避光顯色15min。

    10.終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應（顏色由藍色立轉黃色）。

    11.測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。

    12.計算：根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

    注意事項

    1.樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因為疊氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。

    2.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

    3.樣本應充分離心，不得有溶血及顆粒。

    4.實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。

    5.酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

    6.建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。

    7.牢記樣本已經稀釋5倍，計算結果乘以5才是樣本實際濃度。

    8.本試劑盒定量范圍為62.5-2000pg/mL，超過此范圍，為標準曲線延伸計算所得，不做為準確定量結果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果（62.5-2000pg/mL范圍內），乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。

    9.若顯色過淺，可適當延長底物溫育時間。

    10.為避免交叉污染，標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭；酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復使用封板膜。

    11.試劑盒保質期內使用，不同批號的試劑不得混用。

    12.底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。

    小鼠C肽（C-Peptide）定量檢測試劑盒引進*的、便捷的、實驗技術,擁有快速、簡單、準確、靈敏度高的特點,貨期短,質量優(yōu),現(xiàn)貨供應。