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DU145 人前列腺癌細胞 背景資料

來源:上海奧陸生物科技有限公司   2016年03月17日 17:02  

細胞名稱   人前列腺癌細胞;DU 145 [DU145;DU-145]
形態(tài)特性    上皮樣
生長特性   貼壁生長
特征特性    DU 145 是從一位有3年淋巴細胞白血病史的前列腺癌患者的腦部轉(zhuǎn)移灶中建立的。該細胞系未檢測到激素敏感性,酸性磷酸酶陽性,單個的細胞可在軟瓊脂中形成集落。對此細胞和原始腫瘤的亞顯微結(jié)構(gòu)分析可見微絨毛、微絲、細胞橋粒、線粒體、發(fā)達的高爾基體和異質(zhì)溶酶體。該細胞不表達前列腺抗原。 
培養(yǎng)條件    RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法    1:4~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況   C5
凍存條件    基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測   培養(yǎng)法(-)
STR    Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:12,13,14;D16S539:11,13;D18S51:12;D19S433:13;D21S11:30,33;D2S1338:16;D3S1358:16;D5S818:10,13;D7S820:7,10,11;D8S1179:13,14;FGA:21,22;TH01:7;TPOX:11;vWA:17,18,19;
同工酶   
染色體    59~65
使用權(quán)限   A類

規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶
特點:細胞代數(shù)為4代以內(nèi)
包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運輸方式:快遞運輸
售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決!

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以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo),請及時或郵件。
需要特別指出的是:如細胞出現(xiàn)問題,請于48h內(nèi)及時反饋,本公司將竭誠為您服務(wù)!
一.貼壁細胞  
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當(dāng)細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。 Hela人宮頸癌細胞
二.懸浮細胞 
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
三.一毫升小管操作方法  小管內(nèi)也是此細胞。 
1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)。
2. 嚴格無菌操作,用吸管吸出管中細胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 
4.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

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