●試劑組成

●操作程序

1.  樣本稀釋：用樣本稀釋液（5號液）將待檢血清按1:100稀釋，如5ul血清＋495ul樣本稀釋液，充分混勻。

陰、陽及臨界對照每支加入300ul蒸餾水復溶，充分溶解；復溶后的對照直接加樣，不用再稀釋。

2.  加樣反應：每次試驗設設陰性、臨界、陽性及空白對照各1孔（分別加入陰性、臨界、陽性對照及樣本稀釋液100ul）。樣本檢測孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液（2號液）1滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，每次均需靜置30秒,后一次甩去拍干。

3.  加酶反應：除空白對照孔外其余每孔加酶結合物（1號液）2滴，37℃避光反應30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,如上

洗滌，拍干。

4.  顯色反應：加底物（3號液）和顯色劑（4號液）各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號液）1

滴，混勻，終止反應（加終止液后藍色會變?yōu)辄S色）。

●結果判斷

      以空白對照調(diào)零，用酶標儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度（A值）。當待檢樣本孔A值大于等于陰性對照A值的2.1倍者判為陽性。如陰性對照A值低于0.05時，按0.05計算。

●注意事項

1.試劑盒于2-8℃保存，每次使用前應先平衡至室溫。

2.未使用完的板條應密封保存。

3.試劑盒中終止液具有腐蝕性，要小心使用。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗樣本應為無染菌、無血脂、無溶血的血清或血漿。任何樣本都應視為傳染源妥善處理。

6. 37℃孵育時，建議使用水浴箱。如無條件，可在溫箱中放置濕盒進行反應并同時用不干膠膜封蓋板孔。