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透析膜的使用
下述透析程序是一個(gè)普遍的基礎(chǔ)透析過(guò)程。在開(kāi)始透析之前應(yīng)考慮到許多變數(shù)。透析樣品溶劑,膜的化學(xué)相容性,膜的截留分子量,透析溶劑,透析體積,溫度等變量都會(huì)影響透析速率,因此,一些應(yīng)用中下述透析過(guò)程可能需要適當(dāng)變化。
1.把適量的透析液(緩沖液)加入spectra/por透析膜。透析液的體積應(yīng)為樣品體積量的100倍。(例如:在一升透析液中透析10毫升的樣品)
2.裁剪適當(dāng)長(zhǎng)度的透析管。預(yù)留一段額外長(zhǎng)度(約占總樣品體積量的20%)作為頭部空間。
3.釋放安全鎖打開(kāi)閉合夾。把透析管插入打開(kāi)的閉合夾,在約超出閉合夾3-5毫米的位置再夾住。不要折疊纖維素酯(CE)膜
4.由透析管開(kāi)口端將樣品裝入。調(diào)整一下頂部空間的長(zhǎng)度,夾緊閉合器。
5.把透析樣品放在合適的透析緩沖液中。
6.往透析裝置中放入一個(gè)干凈的磁性攪拌子。要確保磁子足夠大能夠攪動(dòng)整個(gè)透析液,但不能大到無(wú)法自由旋轉(zhuǎn)。把透析裝置放置在攪拌器上,調(diào)整到不把樣品拉下漩渦的zui大速度。
7.透析要根據(jù)具體的應(yīng)用需求。通常情況下,允許過(guò)ye透析。在持續(xù)透析的過(guò)程中,至少要進(jìn)行3次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4小時(shí),6-8小時(shí)和10-14小時(shí)(第2天早晨)更換透析液。在zui后一次透析液的更換后要至少繼續(xù)進(jìn)行2小時(shí)的透析。
8.抓住超出閉合夾部分的透析管,打開(kāi)閉合夾。慢慢倒出透析樣品或用吸管,注射器把樣品移走。非常小的樣品也可用24號(hào)注射針刺穿透析管來(lái)吸取樣品。
透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類(lèi)型。CE可以承受的溫度高達(dá)37°C,再生纖維素RC膜可以承受的溫度60°C,標(biāo)準(zhǔn)級(jí)再生纖維素RC膜可以承受的溫度達(dá)121°C
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