1、原理及適用范圍 

大腸桿菌（Escherichia coli）和大腸菌群（Coliform）都是存在于溫血動物腸道和糞便的細菌，是條件性致病菌，主要造成水體污染，也可能引起食物中毒的發(fā)生。綠洲生化大腸桿菌大腸菌群測試片（FilmplateTM E.coli&coliform count plate BE203）是一種預先制備好的一次性培養(yǎng)基產品，可以同時檢測大腸桿菌和大腸菌群，含有大腸菌選擇性培養(yǎng)基、冷水可溶性的吸水凝膠和半乳糖苷酶（GAL）和葡萄糖醛酸酶（GUD）指示劑。大腸桿菌顯藍色，其他大腸菌群顯紅色，藍點加上紅點為總的大腸菌群數。 本產品適合于食品及原料中大腸菌群的計數，如消毒牛乳、冷飲和調味品等樣品的檢測，也可用于表面的衛(wèi)生檢測。 執(zhí)行標準：食品衛(wèi)生微生物學檢驗大腸桿菌計數——PetrifilmTM 測試片法（GB/T 4789.38）。 

2、操作方法 

2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣罐或均質杯內，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內，振搖后成為1:100的樣品勻液，依次往下稀釋。 

2.2、接種：一般食品選1～2個稀釋度進行檢測，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進行檢測。將大腸桿菌大腸菌群測試片置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固，每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照。 

2.3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內，堆疊片數不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。 

3、結果判讀 

培養(yǎng)后大腸桿菌顯藍色，其他大腸菌群顯紅色，藍點加上紅點為總大腸菌群數。

4、計數原則及報告方式 

4.1、選擇菌落數在15～150個之間的紙片進行計數。 

4.2、若兩個稀釋度的菌落數均在15～150之間，則取其平均菌落數乘以稀釋倍數，即為每毫升（或每克）樣品中的大腸菌群菌落形成單位數； 

4.3、如果所有稀釋度的測試片上的菌落數都小于15，則計數稀釋度zui低的測試片上的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之；如果所有稀釋度的測試片上均無菌落生長，則以小于1乘以zui低稀釋倍數報告之； 

4.4、如果所有稀釋度的菌落數都大于150，計數稀釋度的測試片上的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。計數菌落數大于150的測試片時，也可計數一個或兩個具有代表性的方格內的菌落數，換算成單個方格內的菌落數后乘以20（濾紙區(qū)面積為20cm2），即為測試片上估算的菌落數。報告單位以CFU/mL（或CFU/g）表示。 

5、附加說明 

5.1、樣品勻液的pH值應在6.5～7.5之間，必要時用1mol/L氫氧化鈉（NaOH）或1mol/L鹽酸（HCl）調節(jié)pH。 

5.2、我國的食品衛(wèi)生標準大多都以大腸菌群（Coliform）作為檢測指標，而歐盟等許多國家則以大腸桿菌（E.coli）作為檢測對象，因此，本產品對于出口食品和航空配餐等企業(yè)具有更廣泛的應用前景。

6、綠洲生化大腸桿菌大腸菌群測試片保存條件

本產品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個月內用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現冷凝水，在拆封前將整包回溫至室溫。