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上海研生實(shí)業(yè)有限公司

胚胎成纖維細(xì)胞,沙眼衣原體PCR檢測(cè)試劑盒

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磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒

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  • 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
  • 1920 - 3780 元(具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn))
  • 2024-09-02 21:24:34
  • 上海市
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我要詢(xún)價(jià)

【簡(jiǎn)單介紹】

品牌 其他品牌 貨號(hào) YSH3357
規(guī)格 50管/48樣、100管/96樣 供貨周期 現(xiàn)貨
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒即磷脂酰dan堿水解酶,是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類(lèi)酶的總稱(chēng),廣泛存在于高等動(dòng)植物和細(xì)菌等多種生物體中,具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。

【詳細(xì)說(shuō)明】

商品詳情:
磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒測(cè)定意義

磷脂酶D(EC3.1.4.4)即磷脂酰dan堿水解酶,是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類(lèi)酶的總稱(chēng),廣泛存在于高等動(dòng)植物和細(xì)菌等多種生物體中,具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。

貨號(hào)

規(guī)格

檢測(cè)方法

YSH3357

100管/96樣

微量法

YSH3357-1

50管/48樣

可見(jiàn)分光光度法

測(cè)定原理

磷脂酶D催化水解磷脂酰dan堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和dan堿,dan堿在dan堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫在過(guò)氧化氫酶的作用下將4-氨基安替林和重蒸酚氧化成粉紅色物質(zhì),在500nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,無(wú)水乙醇。
樣品中AA提取:

1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3.血清等液體:直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4.檢出限為100μmol/L。

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磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒ATP檸檬裂解酶(ACL)比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

ATP檸檬裂解酶(ACL)比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣

血清高密度脂蛋白(HDLC)比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

血清高密度脂蛋白(HDLC)比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

血清低密度脂蛋白(LDLC)比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

血清低密度脂蛋白(LDLC)比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣


    
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