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為什么要進行色譜柱平衡

時間:2024/3/1閱讀:508
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一、為什么需要進行柱平衡?

· 置換色譜柱內儲存的溶劑

· 在流動相和固定相之間建立平衡

· 濕潤固定相以實現分析物的分配

· 產生可靠的結果。

二、色譜柱沒有平衡好會產生何種影響?

·基線波動

·保留時間變化

·峰形變形

·分離度變差

·響應異常

·產生鬼峰。

三、哪些因素影響色譜柱平衡?

- 固定相性質:具有龐大基團或空間位阻的固定相(例如苯基柱)可能需要更長的柱平衡時間。

- 表面積:具有較低表面積的固定相有利于更快的柱平衡。

- 孔徑大?。壕哂休^寬孔徑(因此表面積較低)的固定相有利于更快的柱平衡。

-流動相組成:具有較高濃度的緩沖鹽和離子對試劑的流動相需要更長的平衡時間。

-水相的比例:如果流動相中的水相含量較高,柱平衡時間可能較長。

-柱溫:較高的柱溫會加速柱平衡,因為分子運動加快(黏度降低)。

-梯度洗脫中的緩沖鹽濃度:通過在兩個流動相瓶中加入緩沖鹽溶液,以保持洗脫過程中緩沖鹽濃度的穩(wěn)定,有助于加快洗脫過程中的柱平衡速度。

注意:在平衡過程的開始階段應避免使用緩沖鹽:有機相,而是使用比例相符的水:有機溶劑,然后再使用初始流動相平衡。



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