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非洲裂谷熱抗體快速檢測(cè)卡(膠體金法)

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  • 廣州健侖生物科技有限公司
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裂谷熱(RVF)是由裂谷熱病毒引起的,經(jīng)蚊類媒介或接觸傳播的急性病毒性人畜共患病,主要影響的是動(dòng)物,但也能傳染人。初始的癥狀有:發(fā)熱、頭痛、疲勞、關(guān)節(jié)和肌肉疼痛,有時(shí)會(huì)有惡心、嘔吐,部分患者會(huì)出現(xiàn)結(jié)膜炎及畏光的現(xiàn)象;嚴(yán)重者可能會(huì)導(dǎo)致出血、休克、腦炎或肝炎,甚至是死亡。裂谷熱抗體快速檢測(cè)卡(膠體金法)

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裂谷熱抗體快速檢測(cè)卡(膠體金法)

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裂谷熱病毒是白纖病毒科(Phenuiviridae)的一個(gè)成員,即布尼亞病毒目12個(gè)病毒科之一 ,絕大多數(shù)人間感染是與受感染動(dòng)物的血液或器官直接或間接接觸所造成的。病毒可通過(guò)宰殺、幫助接生、獸醫(yī)程序操作或處理畜體或胚胎期間處理動(dòng)物組織而傳染給人。因此,某些職業(yè)群體,如牧民、農(nóng)民、屠宰工人和獸醫(yī),感染的風(fēng)險(xiǎn)較高。

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臺(tái)盼藍(lán)(trypan blue)是一種細(xì)胞活性染料,是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一,常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性或檢測(cè)細(xì)胞的活力?;罴?xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色,而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。臺(tái)盼藍(lán)染色后,通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。臺(tái)盼藍(lán)染色只需3-5分鐘即可完成,操作非常簡(jiǎn)單。

一、染色原理

正常的活細(xì)胞,胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠阻止臺(tái)盼藍(lán),使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi),細(xì)胞不被臺(tái)盼藍(lán)染色;而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞,胞膜的通透性增加,臺(tái)盼藍(lán)染料可穿透細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞,與解體的DNA 結(jié)合,使其著色,從而細(xì)胞變藍(lán)。

通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失,即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。因此,借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以非常簡(jiǎn)便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。

二、染液配制

4%臺(tái)盼藍(lán)母液:稱取4g臺(tái)盼藍(lán),加少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至100ml,用濾紙過(guò)濾,4度保存。使用時(shí),用PBS稀釋至0.4%(相當(dāng)于再10倍稀釋)。

三、染色方法

制備單細(xì)胞懸液,并作適當(dāng)稀釋(106細(xì)胞/ml),取9mL細(xì)胞懸液移入試管中,加1mL 0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液,混勻。

四、結(jié)果觀察

    
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