目錄:上海微科生物技術(shù)有限公司>>德國NOBIMPEX>>淋巴細胞分離液>> S101-100,S101-250人單個核細胞分離液1.077
供貨周期 | 兩周 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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儲存:
本產(chǎn)品對光敏感,應(yīng)該室溫避光儲存,保質(zhì)期 2 年。無菌開封后,保存于室溫。
使用說明:
1. 取新鮮抗凝全血(EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝均可),用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。
2. 在離心管中加入適量分離液(當稀釋后血液體積小于3mL時,加入3mL分離液;大于等于3mL,加入等體積分離液。但二者的總體積不能超過離心管的三分之二,否則會影響分離效果),將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方,注意保持兩液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取血液,然后將血液小心的平鋪于分離液上,因為兩者的密度差異,將形成明顯的分層界面。如果樣品較多加樣時間較長,在離心之前會出現(xiàn)紅細胞成團下沉屬正?,F(xiàn)象。)
3. 室溫,水平轉(zhuǎn)子500~1000g,離心20~30min(血液的體積越大所需的離心力越大,離心時間越長,很好的分離條件需摸索,離心轉(zhuǎn)速大不超過1200g)。
4.離心后將出現(xiàn)明顯的分層:上層是稀釋的血漿層,中間是透明的分離液層,血漿與分離液之間的白膜層即為單個核細胞層,離心管底部是紅細胞與粒細胞
5. 小心的吸取白膜層細胞到15mL潔凈的離心管中,10mL PBS或細胞洗滌液洗滌白膜層細胞。250g,離心10min。
6. 棄上清,5mL的PBS或細胞清洗液重懸細胞,250g,離心10min。
7. 重復步驟6
8. 棄上清,細胞重懸備用。