ACTH,小鼠促腎上腺皮質激素酶聯免疫試劑盒

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠促腎上腺皮質激素（ACTH）的含量。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠促腎上腺皮質激素（ACTH）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠促腎上腺皮質激素（ACTH）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

ACTH,小鼠促腎上腺皮質激素酶聯免疫試劑盒的抑制性測定法操作步驟

本法首先是將特異性抗體a包被于固相載體，經洗滌加入含有欲測抗原之待檢樣品。經孵育洗滌后再加一次未標記的特異性抗體b，而這次加入的抗體b于*次包被于固相載體上的特異性抗體a對被測抗原來說都是特異性的，但不是用同種動物免疫制備的，否則可出現非特異性反應。經孵育洗滌后，再加酶標記抗b抗體，再經孵育洗滌后加底物顯色進行測定。這種方法與雙抗體夾心法不同之處是多加了一層抗體。因此，放大的倍數更高，故比雙抗體夾心法更加靈敏。同時避免標記特異性抗體，而另一優(yōu)點是只要標記一種抗抗體，即可達到多種應用。 

用于測定抗原的尚有第4種叫做抑制性測定法（見圖），它是先用抗原包被固相載體，然后分為二組，一組加入用參考抗體和被檢標本混合孵育后的混合溶液，假如標本中不含抗原，則參考抗體未被結合。因此它可以和包被于固相載體上的抗原結合。如標本中含有抗原，則抗原先與參考抗體結合，故參考抗體不再與包被于固相載體上的抗原結合。對加入酶結合物（抗球蛋白）和底物僅顯示剩余結合的抗體量。再與另一組不加待檢標本的參考系統比較，被檢標本對底物顯色的抑制程度與標本中所含抗原量成比例，二者之差，即為欲測抗原的量。

被檢標本對底物顯色的抑制程度與標本中所含抗原的量成比例，二者之差即為欲測抗原的量。

ELISA常用的幾種方法

一、雙抗體夾心法測定抗原

將抗原免疫*種動物獲得的抗體吸附于固相表面;

加抗原，形成抗原-抗體復合物;

加抗原免疫第二種動物獲得的抗體，形成抗體抗原抗體復合物;

加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體);

加底物。底物的降解量＝抗原量。

二、直接法測定抗原

將抗原吸附在載體表面；

加酶標抗體，形成抗原—抗體復合物；

加底物。底物的降解量＝抗原量。

三、間接法測定抗體

將抗原吸附于固相載體表面；

加抗體, 形成抗原-抗體復合物；

加酶標抗體；

加底物。 測定底物的降解量＝抗體量。

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