詳細介紹
FE,小鼠鐵蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒優(yōu)質(zhì)供應
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠鐵蛋白(FE)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠鐵蛋白(FE)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠鐵蛋白(FE)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
FE,小鼠鐵蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒優(yōu)質(zhì)供應需要但未提供的材料
1. 可在450nm處進行讀數(shù)的酶標儀;
2. 能精確吸取10-200µL的移液器;
3. 可調(diào)多道(8)移液器(50-200µL);
4. 供可調(diào)多道移液器使用的試劑存放槽;
5. 洗瓶或洗板機;
6. 蒸餾水或去離子水;
7. 1升的圓柱形量筒;
8. 移液器:1和(10或25 mL);
9. 移液器槍頭;
10. 紙巾;
11. 計時器,用以監(jiān)控溫育步驟;
12. 處理池和消毒劑(例如:0.5% 次氯酸鈉, 10% 家用漂白水);
注意事項
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室
溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中
不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。 9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
保存: 貯藏于2-8°C。
標本收集
1. 本試劑盒可使用血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、組織液標本。
2. 室溫(20-25℃)下保存標本不要超過8小時。2-10℃保存標本,不超過48小時。如
耽擱的時間更長,請在-20℃或更低的溫度下保存標本。標本避免多次凍融,這樣可能會損失蛋白活性,產(chǎn)生錯誤結果。
準備工作
1. 濃縮洗滌液(20X)用雙蒸水稀釋成1X(至 500ml)。
操作步驟
試劑盒應平衡至室溫(20-25°C )再試驗。 取出所需反應板。
1. 加入10ul標準品(Standards)、10ul標本于相應反應板孔中。
2. 每孔加入40ul Anti mouse IL-1 Biotin 和40ul Anti mouse IL-1 POD。輕輕混勻30秒,封
住板孔,室溫溫育 45分鐘。
3. 洗板:甩盡板內(nèi)液體,用洗滌液洗滌反應板(每孔內(nèi)加入350ul洗滌液),并去除水滴
(在厚疊吸水紙上拍干);反復洗滌5次。
4. 每孔加入100ul顯色液, 輕輕混勻10秒,室溫溫育20分鐘。
5. 每孔加入100ul終止液(Stop Solution)。輕輕混勻30秒;30分鐘內(nèi)在450nm處讀OD
值。
以OD值為縱坐標,以標準品濃度為橫坐標,繪制標準曲線。根據(jù)樣品的OD值可在標準曲線上查出其濃度。