人氧化三甲胺(TMAO)ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人氧化三甲胺(TMAO)的含量。

人氧化三甲胺(TMAO)ELISA試劑盒 注意事項(xiàng)

 

1.嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

 

2.洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

 

3.消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

 

4.底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

 

5.避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

 

6.在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。

 

7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

 

8.任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

 

9.不能使用過期產(chǎn)品。

 

10.如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

 

 

 

試劑準(zhǔn)備

 

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

 

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

 

 

 

人氧化三甲胺(TMAO)ELISA試劑盒 操作步驟

 

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

 

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

 

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

 

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

 

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

 

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

 

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

 

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

 

以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計(jì)算出樣品的濃度。