詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 1號染色體開放閱讀框19抗體 |
英文名稱 | C1orf19 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)*櫻桃鏈格孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠細胞色素P4502E1(CYP2E1) 漢遜德巴利酵母拉丁屬名: Debaryomyces hansenii
大鼠α1微球蛋白(α1-MG)稀疏鏈霉菌稀疏變種用途: 分類 研究
大鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13) 芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus sp.
大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)三葉草根瘤菌用途: 與三葉草共生固氮
大鼠鈣調(diào)素(CAM) 產(chǎn)黑色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces melanochromogenes
大鼠載脂蛋白E(Apo-E)黃桿菌拉丁屬名: Flavobacterium oncorhynchi
大鼠網(wǎng)膜素(omentin)藍色犁頭霉拉丁屬名: Absidia coerulea
大鼠孤腓肽(OFQ/N)白地霉拉丁屬名: Geotrichum candidum
大鼠蛋白酸酶(PP) 球毛殼菌拉丁屬名: Chaetomium globosum Kunze
大鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR)鉤狀木霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)鏈格孢屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠膠原酶II(Collagenase II)綠葉假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas chlororaphis
大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
大鼠膠原酶I(Collagenase I)東方伊薩酵母拉丁屬名: Issatchenkia orientalis
大鼠酸化蛋白激酶C(P-PKC)短小芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus pumilus
1號染色體開放閱讀框19抗體兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒英文名稱:Rabbit Crosslaps,Cr ELISA Kit 進口/分裝
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒英文名稱:Rabbit matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA Kit *
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒英文名稱:rabbit matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit*
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒英文名稱:rabbit matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit*
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒英文名稱:rabbit matrix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA Kit 進口/原裝
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒英文名稱:rabbit tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit進口/分裝小鼠溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠絨毛膜促性腺激素(CG)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 組裝/原裝