鉻酸鉀指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞叉頭框蛋白P3(FOXP3)試劑盒Anti-BCAS3 Antibody胰島素受體底物-1（抗原）
雞雙調(diào)蛋白(AR)試劑盒 Anti-BCAP31 Antibody水通道蛋白-3抗原
雞白共同抗原(LCA/CD45)試劑盒Anti-BCL2L11 Antibody胰島素受體底物-2（抗原）
雞胰島素樣蛋白5(INSL5)試劑盒Anti-BCAS4 Antibod

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產(chǎn)品分類：指示劑

儲(chǔ)存條件：4℃,6個(gè)月

用途：沉淀滴定(莫爾法，Mohr)用指示劑

注意事項(xiàng)：沉淀滴定中用于測(cè)定氯化物和溴化物的指示劑。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

淡紫灰鏈霉菌骨架銜接蛋白BIN3抗體Human GEF-H1 ELISA Kit小鼠opiorphin 免疫試劑盒

假絲酵母屬雙向染色體分裂蛋白1抗體Human GDPD5 ELISA Kit小鼠N-乙?；?絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)免疫試劑盒

產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體Brn3αHuman GFPT1 ELISA Kit小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)免疫試劑盒

泡盛曲霉骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體Human GDPD2 ELISA Kit小鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒

磚紅鐮孢菌腦鈉抗體Human GEFT ELISA Kit小鼠NANOG同源域蛋白(NANOG)免疫試劑盒

猴假單胞菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體Human GEM ELISA Kit小鼠NAD依賴性蛋白脫乙酰sirtuin-1(SIRT1)免疫試劑盒

毛柄金錢菌(金針菇)抑凋亡基因bag1抗體Human GEMIN5 ELISA Kit小鼠NADPH氧化1(NOX1)免疫試劑盒

阿魏側(cè)耳蛙皮受體3抗體Human GEMIN4 ELISA Kit小鼠M型肌激(CKM)免疫試劑盒

大豆慢生根瘤菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體Human GEMIN6 ELISA Kit小鼠MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)免疫試劑盒

牡丹擬盤多毛孢菌骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體Human GEMIN7 ELISA Kit小鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)免疫試劑盒

黑曲霉磷化Bcl-2抗體Human GEMIN4 ELISA Kit小鼠L-乳脫氫A鏈(LDH-A)免疫試劑盒

植物乳桿菌磷化Bcl-2抗體Human GDAP2 ELISA Kit小鼠L解(PAL)免疫試劑盒

谷棒桿菌磷化Bcl-xL蛋白抗體Human GDAP1L1 ELISA Kit小鼠Klotho 免疫試劑盒

大腸埃希氏菌神經(jīng)母瘤相關(guān)蛋白ARID3B抗體Human GDE1 ELISA Kit小鼠KI-67抗原(MKI67)免疫試劑盒

凍干粉  產(chǎn)腸大腸埃希氏菌（陽(yáng)性） 微管蛋白β4抗體Human GDAP1L1 ELISA Kit小鼠I型膠原蛋白免疫試劑盒

光滑青霉霍亂腸β鏈抗體Human GBP4 ELISA Kit小鼠III型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒

考克氏菌Kocuria│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BRβ2糖蛋白試劑盒芹糖異甘草苷

匍枝根霉Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格：BRβ1腎上腺能受體試劑盒芹菜-7-0-（2G-鼠李糖）龍膽糖苷

土曲霉原變種Aspergillus│terreus var. terreus 質(zhì)量規(guī)格：>98% (HPLC),BCβ1,4-N-乙?；肴樘寝D(zhuǎn)移2試劑盒5-羥色
鉻酸鉀指示劑Alpha-Fodrin IgG/IgA(Human alpha-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit  人抗α-胞襯蛋白IgG/IgA規(guī)格： 48T

ssDNA(human single stranded DNA Antibody) ELISA Kit  人抗單鏈DNA/變性DNA規(guī)格： 48T

Human histone H2A-H2B-DNA autoantibody ELISA Kit  人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA/抗二聚體-DNA規(guī)格： 48T

dsDNA(Human double stranded DNA) ELISA KIT  人抗雙鏈DNA/天然DNA規(guī)格： 48T

AnuA-IgG(Human nucleosome antibody IgG) ELISA Kit  人抗核小體IgG規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。